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目前在临床上广泛应用的溶菌酶主要是蛋清溶菌酶，由于蛋清溶菌酶是一种异源蛋白，在人体内可能会产生免疫原性和副作用。人溶菌酶(human lysozyme，hLZ)是人体内的一种蛋白质，和人体具有天然相容性，临床上应用时，比其它溶菌酶更安全，没有刺激性和副作用。但人溶菌酶制备材料相当有限。通常人溶菌酶是从人奶、胎盘或尿液中少量提取，来源极其困难，无法进行工业化生产。为了满足市场需求，本实验室将人溶菌酶基因整合到巴斯德毕赤酵母中，构成基因工程菌Pichia PastorisGS115，诱导表达重组人溶菌酶。 本文对含人溶菌酶基因的Pichia Pastoris GS115的发酵条件进行了研究，通过考察酵母生长规律，工业培养基中碳源、氮源的组成对酵母生长的影响以及不同诱导时间、不同诱导pH值、混合碳源对蛋白得率的影响得出了优化的发酵条件：酵母在培养36h后(即甘油耗尽1—2h后)，结束生长阶段，开始加入甲醇进行诱导表达；诱导总时间维持在72—84h(即3天到3.5天)目标蛋白收率较大；诱导期间采用混合碳源，有利于维持毕赤酵母在工业培养基的正常生长和代谢，有利于提高发酵密度，也有利于提高目标蛋白的表达量；当将传统工业培养基中碳源和氮源的质量浓度分别降低至35g／L和5g／L时，酵母生长期的细胞密度与传统培养基相差不大，但培养时间可减少4h，节省了生产成本；维持诱导期间的pH=4.0