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鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis,DVH)是危害养鸭业的重要疾病,鸭星状病毒1型(Duck astrovirus,DAstV-1)和 2型(Duck astrovirus2,DAstV-2)是DVH 的两种病原,其中 DAstV-1 已在我国多个地区流行。为了解我国DAstV的分子流行病学特点,开展了分子检测工作,并对检出的新DAstV进行了基因组鉴定、致病性和传播途径分析。2012～2014年,从9个地区采集678份样品,从94份(13.9%)样品中检测到DAstV。在阳性样品所含毒株中,48株(51.1%)为DAstV-1,4株(4.3%)为DAstV-2,33株(35.1%)为新DAstV(称为DAstV-3),2株(2.1%)可能属于鸡星状病毒,7株(7.4%)与针尾鸭源星状病毒具有相近的遗传演化关系。结果表明,我国鸭群中流行多种星状病毒。对4株DAstV-2和1株DAstV-3进行了基因组鉴定。序列分析结果显示,DAstV-2和DAstV-3的基因组长度分别为7319nt和7463 nt,基因组结构均符合禽星状病毒的特点。在衣壳蛋白区,DAstV-2和DAstV-3之间的遗传距离为0.612,它们与其他禽星状病毒种的遗传距离分别为0.579～0.721和0.577～0.744,据此可将DAstV-2和DAstV-3鉴定为禽星状病毒属内的两个新病毒种。用3个ORF进行遗传演化分析,结果显示,DAstV-2在遗传演化过程中可能发生过重组,这种现象可影响到禽星状病毒的准确分类。在评估DAstV-2对雏鸭的致病性时,发现刚出壳的雏鸭携带DAstV-3,因此,围绕DAstV-3进行了分子检测。结果显示,从DAstV-3阳性场采样,46%的种鸭新鲜粪便、60%的种蛋、83.9%的死胚和60%的雏鸭呈DAstV-3阳性。从其他6个地区不同孵化场采集130枚出壳前死亡鸭胚,27.7%的死胚为DAstV-3阳性,说明DAstV-3可通过水平和垂直传播途径传播。为观察DAstV-3与孵化中鸭胚死亡的相关性,用鸭胚进行了病毒分离和传代。结果显示,感染鸭胚的尿囊膜增厚、发育受阻,部分鸭胚死亡。用10枚鸭胚进行致病性试验,结果显示,8枚在孵化后期死亡,2枚可孵出雏鸭,但携带病毒。结果表明,DAstV-3是导致孵化中鸭胚死亡的因素之一。DAstV-1是主要流行的鸭星状病毒,研发DAstV-1的疫苗具有重要意义,但DAstV-1的培养较为困难,增加了常规疫苗的研发难度。本研究用杆状病毒表达系统表达了 DAstV-1的衣壳蛋白,并评估了其免疫原性。结果显示,分别在1日龄和14日龄免疫,可刺激雏鸭产生较高水平的抗体。在24日龄接种强毒,免疫组和对照组分别有30%和80%的鸭呈现肝脏出血。结果表明,免疫重组衣壳蛋白可在一定程度上保护雏鸭抵抗强毒感染。根据衣壳蛋白线性B细胞表位预测结果,合成12条多肽。间接ELISA和间接免疫荧光染色的结果显示,DAstV-1抗血清能特异性识别12条多肽,但重组衣壳蛋白的抗血清仅识别3条多肽(A1、A5和A6),4条多肽(A1、A4、A5和A6)的抗血清可与重组衣壳蛋白发生反应。据此鉴定出DAstV-1衣壳蛋白的可能的3个线性B细胞表位,分别位于7～22位、166～179位和199～213位。迄今为止,对DAstV-1致病机理的研究尚属空白。因此,用转录组学技术分析了感染DAstV-1的雏鸭肝脏,共筛选出2377个差异表达基因,其中38.75%为表达上调基因,主要为与免疫应答相关基因,61.25%为表达下调基因,主要为凝血因子和生长代谢相关基因。差异表达基因显著富集到36个生物学过程、18个分子功能和5个细胞组分相关的GO类别,以及与代谢和机体免疫应答相关的43个信号通路。研究结果为进一步研究DAstV-1的致病机制提供了线索。