spindlin1是ssty/spin家族成员,编码一个237个残基的多肽链。它的功能和结构基础目前所知甚少。德国学者对已经报告的spin/ssty家族成员进行了生物信息学分析,发现了一个Spin/Ssty repeat,该实验组认为这个Spin/Ssty repeat是一个新的motif、是独立的功能单位,对该motif进一步分析,预测会形成一种未经报道过的结构---four-stranded beta-structure。 我们原核表达了GST融合的Spindlin1,亲和纯化、切去GST后经阴离子交换色谱纯化,得到了高纯度的重组Spindlin1。我们采用气相悬滴法获得了可供X线衍射的晶体,经过结晶条件优化后,进行了同步辐射收集数据。衍射数据经过软件处理后我们得到了Spindlin1的空间结构,该结构数据已经提交到PDB数据库,登录号为1YDJ,目前数据还没有释放。 我们实验组用真核表达载体pEGFP-N1-spindlin1转染NIH 3T3细胞,对筛选出的稳定转染细胞进行了细胞生物学检测。因此我们在生物信息学和晶体结构的基础上设计了突变体。真核突变载体已经转染NIH 3T3细胞,正在扩大培养。原核突变载体已经交给清华大学结构生物学实验室。这部分工作将最终建立起结构一功能的关系。