【摘 要】
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海洋微生物是生物活性物质的新来源.该论文通过一株采自海泥的海洋细菌9912及其活性物质的研究得到以下主要结果.分离自渤海海泥的海洋细菌9912通过经典的细菌学鉴定及16SrRN
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海洋微生物是生物活性物质的新来源.该论文通过一株采自海泥的海洋细菌9912及其活性物质的研究得到以下主要结果.分离自渤海海泥的海洋细菌9912通过经典的细菌学鉴定及16SrRNA分子生物学鉴定,确定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformus).海洋细菌9912能够产生抗真菌活性物质,对三种致病真菌白念珠菌(Candida albicans)、新生隐球菌(Cryptococcrs meoforms)、石膏样毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)都有明显的抑制作用.应用均匀设计的方法,确定了海洋细菌9912发酵培养基23配方为玉米粉:1％,豆饼粉:0.6,葡萄糖:0.5％,ZnSO<,4>:0.04％,MgSO<,4>:0.02％,KH<,2>PO<,4>:0.04％.其培养条件为:种子液种龄12h,接种量5％,培养基初始pH8.0,装液量为50ml/500ml三角瓶,培养温度28℃,发酵时间22h时活性达到最高,此时,应用二剂量法,以制霉菌素为标准样品,测得海洋9912发酵液的活性相当于5800u/ml.通过离子交换层析、疏水层析、分子排阻层析等一系列分离纯化,得到了抗真菌活性物质的水溶液,经高效液相色谱检测显示为一个主要吸收峰(条件为C<,18>反相柱,0~30％乙睛梯度洗脱,220nm紫外监测)经基质辅助激光解析/离子化—飞行时间质谱(MALDI—TOF)检测得到分子量为1873D.活性物质带少量正电荷,能够被链酶蛋白酶水解失活,双缩脲反应呈阳性,200nm处有最大的紫外吸收峰280nm没有吸收峰,具有多肽的特征,并且比较耐高温.
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