过敏性哮喘患者树突状细胞的变化及其对Th1和Th2细胞因子平衡的影响

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目的:探讨过敏性哮喘患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(dendritic cell,DC)产生IL-12和IL-10的差异,及其对Th1和Th2型细胞因子平衡的影响.方法:分别取哮喘患者和正常人外周血经Ficoll和不连续密度梯度离心法获取贴壁细胞,经GM-CSF和IL-4体外培养为不成熟DC(iDC),加入细菌的胞壁成分脂多糖(LPS)刺激使其发育为成熟DC(mDC).另取脐血同上方法获得非贴壁细胞,分别加CD4单抗和CD45RA单抗及磁珠分离得到CD4+CD45RA+T细胞(原始T细胞,Th0).Th0和两组mDC共培养,通过ELISA法检测mDC分泌的IL-12和IL-10及T细胞分泌的IFN-γ和IL-4的含量.结果:1.哮喘组PBMC来源的DC产生IL-1 2[(21 7.79±11 8.65)pg/ml]较正常对照组[(905.66±495.32)pg/ml]显著减少,P<0.005;IL-12亚单位IL-12p40[(2072.22±1496.37)pg/ml]亦较对照[(5569.43±2922.75)pg/ml]明显降低,P<0.01;IL-10[(336.89±261.52)pg/ml]较对照[(5569.43±2922.75)pg/ml]降低,P<0.025.2.混合淋巴细胞反应中,哮喘组T细胞释放Th1型细胞因子IFN-γ[(368.56±190.72)pg/ml]较对照组[(584.91±290.1 3)pg/ml]减少,P<0.05;相反,Th2型细胞因子IL-4[(425.33±164.94)/pg/ml]较对照[(49.86±18.14)pg/ml]显著增多,P<0.0005.3.无论哮喘组还是对照组,IL-12和IFN-γ均呈正相关关系,分别r=0.7581,P<0.01和r=0.6028,P<0.025;IL-12和IL-4均呈负相关关系r=-0.7498,P<0.01和r=-0.7481,P<0.001.4.哮喘组IL-10与IFN-γ呈正相关;r=0.6437,P<0.05,对照组二者则无直线相关关系,r=0.4312,P<0.1.5.两组IL-12和IL-10均呈正相关关系,哮喘组r=0.9258,P<0.0005,对照组r=0.8517,P<0.005.结论:由于哮喘病人DC功能缺陷,产生IL-12和IL-10减少导致Th0向Th2优势分化,从而使两型细胞因子平衡向Th2型倾斜,合成IL-4增多和IFN-γ减少是哮喘发生的重要机制.
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