细胞色素P450酶系是一类普遍存在于脊椎动物或无脊椎动物(包括昆虫)、植物和微生物中的代谢酶系。在生命过程中，内源物质的代谢与转化或外源化合物的活化与降解等都需要细胞色素P450酶系的催化与调控。野桑蚕(Bombyxmandarina Moore)是一种主要的鳞翅目害虫，严重影响桑树生长和蚕业发展，同时，它与家蚕有非常近的亲缘关系。为深入了解野桑蚕细胞色素P450的结构和功能，我们就野桑蚕不同组织细胞色素P450 CYP305B1V1基因的诱导表达特征及其启动子活性开展了研究，主要研究结果如下： 用不同浓度梯度的NaF、芸香苷、氯氰菊酯溶液浸泡过的桑叶添食家蚕和野桑蚕，研究不同药物对野桑蚕和家蚕主要生理特征的影响。48 h后，各个试验组中，家蚕和野桑蚕的死亡率分别为：10-4 mol/L NaF(66.7％，13.3％)；5×10-3ng/μL芸香苷(60％，26.7％)；0.1 ng/μL氯氰菊酯(46.7％，11.3％)。家蚕的死亡率明显高于野桑蚕，表明在供试浓度范围内，野桑蚕对NaF、芸香苷和氯氰菊酯的耐受性明显强于家蚕。 以上述四种药物添食后存活的野桑蚕为材料，参照GenBank中公布的野桑蚕CYP305B1V1基因的mRNA序列，设计1对引物，采用半定量RT-PCR方法分析经NaF、芸香苷、氯氰菊酯和蜕皮激素处理的野桑蚕各组织中CYP30581V1基因的表达情况，并对该基因的氨基酸序列进行同源比较和进化分析。结果显示，氯氰菊酯、芸香苷和NaF对于野桑蚕CYP305B1V1基因在组织中的表达是有影响的，而蜕皮激素无明显影响。氨基酸的同源性分析表明该基因氨基酸序列与家蚕CYP305B1的氨基酸序列同源性最高，为100％；与赤拟谷盗可能的CYP305 A1、蜜蜂可能的CYP305A1、果蝇CYP305A1、冈比亚按蚊CYP305A2及库蚊CYP2L1之间有较高的同源性。 用PCR方法从野桑蚕基因组DNA中扩增了细胞色素P450 CYP305B1V1基因转录起始位点上游1000和1500 bp左右的2段序列，构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒pGL-YTA和pGL-YTB，和内参载体pRL-TK一同在脂质体的介导下转染Sf9细胞，通过用NaF、芸香苷、蜕皮激素以及氯氰菊酯的诱导，体外分析该基因启动子的转录活性及与调控相关的因素。结果发现pGL-YTA和pGL-YTB两个报告质粒的荧光素酶相对活性分别是基本载体pGL3-Basic载体的5.2倍和2.1倍，说明这两段序列都具有启动子活性，且在转录起始位点上游1000-1500bp之间的序列可能具有与转录抑制相关的元件。四种诱导物诱导结果表明，对于pGL-YTA，10-2mol/L的NaF可以使该启动子在诱导前后相对活性增加1.8倍；对于pGL-YTB，10-2mol/L的NaF和0.05ng/μl的氯氰菊酯分别可以时该启动子在诱导前后相对活性增加2.25倍和5.39倍。 基因诱导表达和启动子活性分析综合表明，CYP305B1V1基因在野桑蚕体内可能主要参与外源性的有毒物质的代谢过程，其具体作用机制还待进一步研究。