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杨桃是我国主要的农作物之一,含有丰富的营养成分和功能成分。如何综合有效地开发利用我国丰富的杨桃资源具有重要的实际意义。多酚物质具有抗氧化、抑菌、抗癌、抗老化等众多生理活性,近年来成为研究开发的重点,而杨桃是富含多酚物质的一种水果作物,本课题选择杨桃渣作为原料,以其中的多酚类化合物作为研究对象,先建立合适的多酚定量方法,然后研究了杨桃渣多酚的微波提取工艺,并进行了优化,之后对杨桃渣中的多酚物质进行纯化,最后对杨桃渣多酚的体外抗氧化活性进行了研究,为合理利用杨桃资源提供理论依据。
对测定总酚含量的Folin-Ciocalteu比色法进行了系统研究,建立适用于测定杨桃渣提取液中多酚类物质含量的简易方法。结果表明,Folin-Ciocalteu试剂浓度为1:1,Na2CO3溶液浓度为7.5%,在25℃下反应30min,没食子酸浓度在0~80μg/mL时与其吸光值有良好线性关系。方法变异系数为3.52%。该方法具有操作简便,稳定性和重现性好等优点,可用于测定杨桃渣提取物中总多酚的含量。
本文研究了微波法提取杨桃渣多酚的工艺路线,采用单因素和正交试验对影响杨桃渣多酚的微波提取工艺条件进行了探讨,筛选出了最佳提取条件为乙醇浓度为50%、料液比为1:60、微波功率为700W、提取时间为60s。与前人通过索氏提取、超声波提取多酚的工艺相比,微波法提取率更高,且所需时间短,在天然产物提取上具有很高的生产利用价值和很广阔的应用前景。
通过吸附、解吸试验,筛选适合纯化杨桃渣多酚的大孔吸附树脂并确立纯化工艺参数,最终确定AB-8型大孔吸附树脂为杨桃渣多酚的分离材料。通过动态吸附实验得到它的最佳吸附条件为:上柱料液浓度0.9mg/mL,pH4.5,上柱速率为2BV/h。由解吸实验得到最适解吸条件为:乙醇浓度60%,解吸速率2BV/h,洗脱体积为2BV,在此条件下,经纯化的杨桃渣多酚样品中多酚含量为58.82%。本文研究结果表明,该树脂对于本体系中的多酚具有吸附快、解吸较易、流体流动性能好、操作简单和周期短等优势,因而有利于规模化生产。
采用3个不同体系研究了杨桃渣多酚粗提液、AB-8树脂纯化液的体外抗氧化性能。研究结果表明,杨桃渣多酚提取物具有抗氧化功能,在一定浓度范围内杨桃渣多酚提取物有很强的抗氧化效果,并且存在一定的效量关系,但在不同抗氧化体系中活性有所差异。本文研究结果表明,在一定浓度范围内总抗氧化能力从高到低为:纯化液>Vc>粗提液。杨桃渣多酚粗提液、纯化液、Vc及BHT均有较强的抑制羟自由基能力,而且较低浓度就能达到平衡。但杨桃渣多酚纯化液抑制羟自由基能力更强,而且在最低的浓度就达到了平衡。抑制羟自由基能力由高到低:纯化液>粗提液>Vc>BHT。各样品对超氧阴离子的清除能力由强至弱顺序为:粗提液>纯化液>Vc>BHT。杨桃渣多酚对超氧阴离子的清除能力要大大优于BHT。而且,杨桃渣多酚粗提液在0.5%时就已经达到了平衡。通过抗氧化能力测试,作为一种安全、天然、无毒的抗氧化剂,杨桃渣多酚与Vc及BHT等抗氧化剂相比,有一定的优势。
综上所述,Folin-Ciocalteu比色法能很好地测定杨桃渣提取物的总酚含量;在优化的微波提取法条件下,提取率比较高,且所需时间短;利用大孔树脂纯化粗提物,操作简易,周期短;杨桃渣多酚与生产中常用抗氧化剂相比,抗氧化能力更强,且安全、天然、无毒;这为食品中使用杨桃渣多酚这一天然抗氧化剂提供了一定的理论依据。