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细胞的增殖调控是生命体赖以生存和发展的基础,对细胞的增殖调控机制进行研究能够为肿瘤的治疗提供新的药物靶点,并能为药物的研发奠定理论基础。本论文就两个对细胞增殖起调控作用的蛋白KIAA0157和Hepassocin调节细胞增殖的机制进行研究。KIAA0157是一种功能不明的新基因。我们前期的研究发现KIAA0157在多种肿瘤组织中下调表达,过表达可抑制多种细胞的克隆形成能力。本论文研究发现:过表达KIAA0157能增强p53的稳定性和p53活性,RNAi下调细胞内KIAA0157表达加速p53降解,抑制p53活性;KIAA0157以p53依赖的方式抑制细胞集落形成并诱导细胞发生G0期阻滞。KIAA0157可与MDM2发生相互作用,并抑制MDM2介导的p53泛素化和降解。这些研究结果表明KIAA0157可能通过MDM2调节p53稳定性及其活性,并在肿瘤细胞增殖调控方面发挥作用,为今后的癌症治疗提供了新的靶点。Hepassocin(HPS),是一种肝脏特异表达蛋白质,在肝损伤修复、肝源细胞增殖调控中发挥重要作用。前期研究表明HPS可特异性刺激正常肝细胞增殖,但过表达抑制肝肿瘤细胞增殖,其分子机制不明。我们的研究发现:1)采用免疫印迹和ELISA方法证明正常肝细胞系L02细胞能够产生并分泌HPS;2)HPS蛋白质的细胞外分泌依赖于N端22个氨基酸。3)利用FITC标记的HPS证实L02细胞膜上存在HPS特异受体;4)HPS中和抗体可中和L02细胞条件培养液的增殖刺激活性并抑制L02细胞增殖。这些研究表明HPS可通过自分泌循环调节L02细胞增殖,阻断这个循环可抑制L02细胞的增殖。为研究HPS对肝癌细胞生长的影响,我们在HepG2肝癌细胞中过表达野生型HPS和N端22个氨基酸缺失HPS(非分泌型HPS),结果发现两种HPS均可抑制HepG2细胞的克隆形成能力,并导致细胞发生G0/G1期阻滞,但非分泌型HPS的抑制作用要显著强于野生型HPS。此外,虽然HepG2肝癌细胞也产生和分泌HPS,但外源HPS对肝癌细胞的增殖并无明显影响。这些结果表明HPS可能通过细胞内机制抑制肝癌细胞的增殖。我们对Hepassocin对肝细胞及肝癌细胞生长调节机制的研究为今后Hepassocin作为肝损伤类药物的开发提供了理论平台。