MicroRNA-10b基因转染对人原发性肝癌细胞侵袭及转移的影响

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背景原发性肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,对于肝癌患者的最主要治疗手段还是根治性切除,但是目前对于根治性切除肝癌后的转移仍然是束手无策,手术切除后5年转移复发率高达70%,生存率只有17%~53%。所以寻找新的途径来解决这个难题已成燃眉之急。microRNA(miRNA)是一类长约21-26bp的单链非编码RNA,它通过影响靶基因以及其相关表达产物的水平参与多种生命活动。多种microRNA已被认定与肿瘤的发生及转移有关。最近的研究发现,microRNA-10b(miRNA-10b,miR-10b)在肝癌组织中的表达水平较正常组织高,这提示miR-10b可能在肝癌的发生及发展过程中起到一定作用。本文主要探讨的是miR-10b对人肝癌细胞侵袭及转移行为的影响。目的研究miR-10b基因对人肝癌细胞HepG2侵袭和转移能力的影响。方法以脂质体转染法将miR-10b重组正、反义真核表达质粒载体转染HepG2细胞株,并通过荧光显微镜(定量或者定性)和运用实时荧光定量PCR和荧光检测转染效率,通过侵袭实验和western blotting,进而检测不同组间迁移和侵袭能力的差异及其对PPAR-a,MMP-9及E-cad蛋白的表达的调控。结果1.实时荧光定量PCR表明,转染正义miR-10b重组载体可以使miR-10b表达水平提高。2.高表达miR-10b对HepG2细胞株产生促进增强侵袭和迁移作用,增加PPAR-a,MMP-9,降低E-cad蛋白的表达。3.转染反义miR-10b重组载体可得到相反的结果。结论microRNA-10b对人肝癌细胞HepG2的侵袭和转移产生影响。
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