灵杆菌素分离纯化及其抑制肿瘤细胞增殖的研究

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sanhaijin123
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本文研究了粘质沙雷氏菌中灵杆菌素的提取方法,采用热酚水法提取灵杆菌素以及对提取出的脂多糖粗制品进行了纯化,并通过MTT法、电镜、PT-PCR和DNALadder、流式等方法对灵杆菌素的抗肿瘤增殖作用进行初步研究。发现灵杆菌素对结肠癌LS174t细胞有明显的抑制作用并呈浓度时间依赖关系;其诱导LS174t细胞出现典型的细胞凋亡超微结构改变;RT-PCR检测发现经不同浓度(5、10、25、50、100μg·ml-1)的灵杆菌素处理后细胞中bcl-2的表达下调,bax的表达上调;DNA电泳出现凋亡特有的“梯子”条带;流式细胞仪检测发现灵杆菌素可引起LS174t细胞凋亡并阻滞于S期。表明灵杆菌素能有效地通过诱导凋亡抑制LS174t细胞生长,其机制可能与抑制抗凋亡因子bcl-2的表达,增强凋亡因子bax的表达有关。
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