Nafion界面电动浓集与PDMS芯片电泳联用方法研究

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近二十余年来,微流控芯片技术得到了迅速发展,它具有体积小、易于集成化及自动化等优点。然而微型化要求检测方法具有更高的灵敏度,这严重阻碍了微流控芯片的应用,特别是在生化样品分析方面。为了保持微芯片分析系统的特点,同时又有效利用现有检测手段的检测灵敏度,基于不同原理的在线样品预浓集技术倍受关注。其中基于微纳界面上的浓度极化效应的在线浓集方法表现出特有的潜力。本论文第一章介绍了微纳界面浓度极化理论,对现有电动进样技术的发展及微流控芯片的制作方法进行了综述。第二章,采用PDMS浇铸法制作了一种新型的芯片电泳系统,并利用PDMS的弹性将Nafion微纳界面引入该芯片系统。用荧光素钠探针分子对该界面上的电动浓集进行了研究,对不同浓度荧光素钠溶液的浓集倍数进行了估算,考察了电压及缓冲溶液浓度对浓集效果的影响。该芯片在10 min内对10-5 mol/L的荧光素钠取得了103倍的浓集。第三章,以荧光素钠为探针分子研究了芯片上的进样,浓集及与电泳分离联用的方法。由于芯片“十字”通道交叉点的接触面积小,进样中泛流作用小,简化电动进样电压控制程序,且进样稳定重现性好,五次循环进样检测峰的峰高、峰面积、半峰宽的相对标准偏差分别为0.058、0.092、0.103。浓集与电泳联用后提高了荧光探针分子的检测信号。最后,结合无胶筛分电泳,在该芯片上实现了11个片段的DNA Marker的进样分离。本文介绍的制作芯片的方法不仅制作简单、廉价而且可反复使用。尽管生物大分子电动浓集和电泳分离的结合有待进一步展示,该芯片在提高芯片电泳的分析性能方面仍有很大的潜力。
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