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背景:目前,肺癌已成为全世界范围内致死率最高的恶性肿瘤,其中约85%为非小细胞肺癌,肺癌的侵袭和转移是导致患者死亡的主要原因。肿瘤细胞发生上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是肿瘤获得侵袭和转移能力的关键过程,其主要特征为细胞黏附分子(如E-cadherin)的表达下调、细胞极性丢失、以及细胞的侵袭和转移能力增加等。诱导EMT发生的重要因素之一是转化生长因子-β(Transforming growth factorβ,TGF-β)。TGF-β是一类多功能细胞因子,能调节细胞的生长、分化和凋亡,在肿瘤发生发展的不同阶段具有抑制肿瘤和诱发肿瘤的双重作用。在肿瘤形成的初期,TGF-β作为抑癌因子发挥其抑制肿瘤的作用;而在肿瘤晚期,由于机体微环境的改变,TGF-β反而能够促进肿瘤细胞的转移,起到了促癌作用。TGF-β主要通过Smad依赖通路和非Smad依赖通路参与EMT的发生。Ski基因是TGF-β通路的主要负调控因子,通过与Smad蛋白的相互作用从而抑制TGF-β通路的信号转导。多项研究表明,Ski在不同肿瘤类型的发生发展中可作为癌基因或抑癌基因发挥双重作用。但是,在非小细胞肺癌中,Ski能否影响TGF-β诱导的EMT和细胞迁移尚鲜见报道。方法:首先采用荧光实时定量PCR技术和Western blot方法分别检测5株非小细胞肺癌细胞株和不同肺癌组织中Ski基因的表达情况;并将95C非小细胞肺癌细胞株的Ski基因敲弱,建立95C稳转细胞株,在稳转细胞株中外源加入TGF-β1后,采用Western blot技术检测EMT分子标记物(E-cadherin、N-cadherin)以及p-Smad3、Smad3的表达情况;然后构建PAI-1启动子区荧光素酶报告质粒,该质粒含有Smad蛋白结合元件,将质粒瞬时转染入95C稳转细胞株中,检测其在外源TGF-β1刺激下的荧光素酶活性;最后应用细胞划痕实验检测Ski对95C细胞株迁移能力的影响。结果:Ski基因在转移的非小细胞肺癌细胞株中,其表达量明显低于未转移的非小细胞肺癌细胞株;外源加入TGF-β1刺激下,Ski敲弱的95C细胞株中EMT现象更为明显,且p-Smad3表达量升高,PAI-1启动子区荧光素酶活性增强,表明Ski对于TGF-β1诱导的95C细胞株的EMT具有明显抑制作用,其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad信号通路有关。细胞划痕试验显示,Ski对95C细胞株迁移能力具有抑制作用。结论:Ski基因在转移的非小细胞肺癌中的表达量明显低于未转移的非小细胞肺癌,Ski基因的表达对非小细胞肺癌的发生发展有一定影响,可能与非小细胞肺癌的侵袭与转移有关。Ski基因对于TGF-β1诱导的非小细胞肺癌95C细胞株的EMT和细胞迁移具有明显抑制作用,其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad信号通路有关。