隐孢子虫病是一种重要的人畜共患寄生虫病。微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum,C.parvum)作为该病主要病原之一,能引起幼龄、老龄和免疫抑制个体持续性腹泻。C.parvum可经粪口途径进入宿主消化道,在消化液的作用下卵囊壁破裂,随后子孢子溢出,入侵宿主小肠上皮细胞。在C.parvum感染过程中,树突状细胞(DC)作为肠道黏膜免疫的一种重要细胞,可将获取的C.parvum抗原进行加工后呈递给T细胞,进而启动机体适应性免疫。DC分泌的可溶性CD83(sCD83)可负反馈调节DC的成熟以及单核细胞向DC的分化。大量的研究数据显示,sCD83是一种抗炎和免疫抑制介质。但是sCD83是否参与调节免疫抑制个体抗微小隐孢子虫感染,尚未见报道。因此,本研究开展了sCD83对微小隐孢子虫免疫调节机制的研究。首先,使用RT-PCR扩增鼠源sCD83,构建pGEX-4T-1-sCD83表达质粒,表达并纯化重组蛋白。结果:成功鉴定出C.parvum克隆出393 bp条带,融合表达蛋白大小为38 kDa。体外试验中采用流式细胞细胞术分析sCD83调节小鼠骨髓源DC识别C.parvum能力。结果显示:sCD83处理组与sCD83未处理的DCs成熟度相比于空白对照组差异极显著(P<0.01),sCD83处理组DCs成熟度显著高于sCD83未处理组(P<0.05)。表明sCD83能够促进DC对C.parvum的识别并分化成熟。通过CCK8和qPCR检测DC-T细胞共培养实验中sCD83对CD4~+T细胞增殖及分化的影响。结果显示:CCK8检测阳性对照组显著高于空白对照组(P<0.05),其他组差异不显著(P>0.05)。以空白对照组为1,Th1型细胞因子(IFN-γ),sCD83处理组(0.95倍)高于sCD83未处理组(0.26倍),差异显著(P>0.05),Th17型细胞因子(IL-6),sCD83处理组(1.26倍)高于sCD83未处理组(0.44倍),且差异显著(P>0.05);Th2型细胞因子(IL-4)两组差异不显著(P>0.05)。表明sCD83蛋白促进识别C.parvum的DC对Th1型和Th17型细胞分化。最后在体内试验中以免疫抑制KM鼠为模型,通过组织切片和qPCR法研究sCD83对C.parvum感染程度及对肠道炎症和免疫调节的影响。结果显示:sCD83处理组卵囊数和GP40/15表达水平分别是未处理组的1.76和4.08倍,差异显著(P<0.05);组织学检查显示,sCD83处理组每10个绒毛平均C.parvum卵囊数是未处理组的2.22倍,且两组间差异显著(P<0.05)。sCD83处理组血液中的IL-12是未处理组的1.68倍;sCD83处理组中的肠道中炎症因子IL-1β、IL-6、和Arg-1是空白对照组的1.64、1.94和3.51倍,显著高于sCD83未处理组(0.46、0.65和1.75倍),Th1型免疫相关因子IFN-γ和Th2型免疫因子IL-4和Th17型免疫因子IL-17方面,sCD83处理组是空白对照组的52.10、268.15和49.94倍,sCD83未处理组是对照组的2.76、78.98和16.76倍,sCD83处理组显著高于未处理组(P<0.05)。揭示感染C.parvum的免疫抑制小鼠在sCD83作用下加重了小肠炎症和感染水平,同时sCD83促进了小肠中Th1、Th2和Th17型免疫。这为揭示sCD83在微小隐孢子感染的先天性免疫机制奠定了基础。