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传染性法氏囊病病毒(IBDV)属于双RNA病毒科禽双RNA病毒属,主要侵害3-6周龄的雏鸡,发病后导致严重的免疫抑制,目前对该病引起的免疫抑制机理依然不甚明了。本研究利用IBDV体外感染模型,系统研究了IBDV基因组dsRNA及其编码的病毒蛋白与宿主干扰素系统间的相互影响,旨在为深入研究IBDV的免疫抑制机制和寻找潜在药物治疗靶点奠定基础。Ⅰ型干扰素是宿主抵抗病毒感染的第一道防线,模式识别受体RLR和TLR是抗病毒先天免疫反应过程中介导Ⅰ型干扰素表达的主要途径。鸡Ⅰ型干扰素是最先被发现和命名的,但对于鸡抗病毒先天免疫过程中干扰素的诱生过程依然不是很清楚。本研究首先克隆了鸡MAVS基因,通过与哺乳动物MAVS比较,发现鸡MAVS具有与哺乳动物MAVS相同的结构域组成及亚细胞定位关系。功能分析发现,鸡MAVS与胞内dsRNA诱导鸡IFN-p的表达密切相关。通过构建鸡MAVS和转录因子IRF3共表达载体转染细胞后发现,在过表达鸡MAVS上调鸡IFN-β表达的过程中,IRF3并不发生入核,表明鸡MAVS与胞内dsRNA诱导鸡IFN-p的表达相关,但在此过程中不涉及转录因子IRF3的入核。体内研究发现,鸡Ⅰ型干扰素具有抗IBDV的功能。我们通过建立IBDV细胞感染模型发现,鸡Ⅰ型干扰素同样具有非常显著抑制IBDV复制的功能。同时还发现IBDV感染并不能诱导宿主细胞Ⅰ型干扰素的上调表达,但是纯化的IBDV基因组dsRNA的胞内刺激可以显著诱导鸡IFN-β的上调表达,并且通过RNA干扰和IBDV基因组dsRNA pulldown实验证实胞内模式识别受体MDA5负责对IBDV基因组dsRNA的识别。利用荧光素酶报告基因系统和构建的病毒蛋白诱导表达系统发现,VP3可以阻断IBDV基因组dsRNA诱导的鸡IFN-p表达。dsRNA pulldown实验发现VP3具有结合dsRNA的性质,并证明其他双RNA病毒的VP3蛋白也具有此性质。点突变VP3发现,VP3蛋白K99R102K105K106位的碱性氨基酸共同负责了对dsRNA的结合。且过表达dsRNA结合能力显著减弱的突变体VP3对于IBDV基因组dsRNA诱导产生鸡IFN-p的阻断能力显著下降。IBDV基因组dsRNA竞争结合实验发现,VP3对dsRNA的亲和力远大于MDA5对dsRNA的亲和力,病毒感染DF-1细胞时也得到相似的结果,并且免疫共沉淀结果显示VP3与MDA5即使在dsRNA存在的条件下也不发生相互作用,换言之MDA5与VP3不能结合同一个dsRNA分子。所以,VP3与MDA5竞争结合IBDV基因组dsRNA是IBDV感染过程中阻断IFN-β上调表达的主要机制。