【摘 要】
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目的:本研究初步了解miR-608对胃癌SGC7901细胞侵袭的影响与机制,为揭示胃癌发病的分子机制提供实验资料。方法:1、采用生物信息学方法,通过软件预测RTN4基因结合的miRNAs,通过实时荧光定量PCR检测胃癌SGC7901细胞中miR-608的表达。2、采用软件预测miR-608在RTN4基因3’-UTR区域的结合位点,荧光素酶报告基因检测miR-608与RTN4基因3’-UTR的相互结
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目的:本研究初步了解miR-608对胃癌SGC7901细胞侵袭的影响与机制,为揭示胃癌发病的分子机制提供实验资料。方法:1、采用生物信息学方法,通过软件预测RTN4基因结合的miRNAs,通过实时荧光定量PCR检测胃癌SGC7901细胞中miR-608的表达。2、采用软件预测miR-608在RTN4基因3’-UTR区域的结合位点,荧光素酶报告基因检测miR-608与RTN4基因3’-UTR的相互结合。3、将miR-608转染SGC7901细胞,检测RTN4在SGC7901细胞中的表达情况;采用划痕实验与Transwell迁移侵袭实验观察miR-608对SGC7901细胞迁移侵袭的影响。4、Western-blotting检测SGC7901细胞中NF-κB信号通路的活化情况。结果:1、生物信息学结果发现,miR-608可与RTN4基因结合;实时荧光定量PCR检测结果显示,miR-608在胃癌SGC7901细胞中低表达(P<0.05)。2、miR-608与RTN4基因3’UTR的591-598位核苷酸结合;miR-608高表达后RTN4的荧光素报告酶报告基因系统活性降低,SGC7901细胞中RTN4表达也降低(P<0.05)。3、划痕实验结果显示,miR-608高表达后SGC7901细胞的迁移距离小,细胞的迁移能力降低(P<0.05);Transwell迁移侵袭实验结果显示,miR-608高表达后SGC7901细胞的迁移与侵袭细胞数均明显减少,细胞的迁移与侵袭能力均降低(P<0.05)。4、Western-blotting结果显示:miR-608高表达后抑制SGC7901细胞中NF-κB信号通路的活化(P<0.05)。结论:miR-608下调RTN4表达,抑制NF-κB信号通路的活化,降低SGC7901细胞的迁移与侵袭能力。
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