【摘 要】
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新基因克隆的方法很多，利用细胞间基因表达的差异是克隆功能性新基因最有效的手段之一。其中最常用的方法就是消减杂交。 本研究以消减杂交为基础，利用新的技术，借鉴抑制性消减杂交和代表差异分析等方法的优点，建立了一种可批量克隆差异表达基因（包括低丰度表达基因）的简易分析方法，并用于脂多糖刺激后人牙髓细胞特异性表达基因的克隆，实验证明效果良好。利用该方法，我们构建了脂多糖刺激后人牙髓细胞特异表达基因的
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新基因克隆的方法很多，利用细胞间基因表达的差异是克隆功能性新基因最有效的手段之一。其中最常用的方法就是消减杂交。 本研究以消减杂交为基础，利用新的技术，借鉴抑制性消减杂交和代表差异分析等方法的优点，建立了一种可批量克隆差异表达基因（包括低丰度表达基因）的简易分析方法，并用于脂多糖刺激后人牙髓细胞特异性表达基因的克隆，实验证明效果良好。利用该方法，我们构建了脂多糖刺激后人牙髓细胞特异表达基因的扣除cDNA文库。从扣除文库中随机挑选了23个含有插段的克隆，经杂交鉴定，其中6个克隆为非特异性表达基因，其余17个为特异性表达基因，对该17个克隆进行序列测定，发现13个为已知基因，且多为细胞周期调控基因，其余4个为未知基因。通过步移法测定完未知基因的全长序列，经Internet GenBank数据检索，计算机序列分析，结果表明，4个基因序列均为新序列，且其中3个序列中包含有开放读框。4个新基因序列均已录入GenBank，录入号分别为AF143740，AF145122，AF147724和AF147723．
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血小板／T细胞活化抗原1（platelet and T cell activation antigen 1，PTA1）是1997年基因克隆的新分子，属于免疫球蛋白超家族（IgSF）成员，胞膜外区含有2个免疫球蛋白V样结构域，表达于活化T淋巴细胞、NK细胞和巨核细胞／血小板表面。IL-2、TNF-α、佛波酯（PMA）和PHA对PTA1的表达有上调作用，TGF-β有下调作用。PTA1单抗可以诱导血小板
成骨蛋白-1（Osteogenic Protein-1，OP-1）又称骨形成蛋白-7（Bone Morphogenetic Protein，BMP-7）。最早由Ozkaynak发现，并于1990年将其基因克隆成功。随后对它的蛋白组成、生物学作用等有了深入的认识。OP-1属TGF-β超家族，与TGF-β家族成员有很高的同源性。人的OP-1基因位于第20号染色体上，其全长cDNA 1878bp，开放读
Müller细胞是视网膜中主要的胶质细胞。既往曾认为它在视网膜中只是起支持和营养作用。但是近年来，由于许多新技术如纯化细胞培养技术、细胞内Ca2+成像技术以及膜片钳等技术的发展和应用，日益增多的实验证据表明，Müller细胞比过去的认识更为复杂的多。它与视网膜神经元之间存在着双向通讯，可通过改变细胞外空间神经活性物质的浓度或通过控制神经元的微环境来调制神经元的活动。因此，在视网膜信息处理中起着主动
IL-2是神经免疫内分泌网络共享的细胞因子，能影响垂体细胞增殖和垂体激素的合成和分泌。雌激素是一种类固醇激素，对垂体也有重要的作用，能促进垂体细胞的增殖和几乎所有垂体激素的合成和分泌。雌激素受体（ER）通过一系列细胞内信号转导途径介导雌激素对垂体细胞的增殖和激素的分泌。我们以前的研究表明，IL-2和雌激素在大鼠垂体前叶有交互作用。本课题旨在进一步证实两者在垂体前叶的相互关系，并确定其交互作用的分子
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