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目的研究天麻素对脊髓损伤大鼠神经元中脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响,探讨天麻素对大鼠脊髓损伤神经元的保护作用机制,为天麻素治疗脊髓损伤提供实验依据。方法1、动物分组:根据实验要求,选取45只大鼠样本,按随机数目表法分为:A组:天麻素治疗组;B组:生理盐水治疗组;C组:假手术组。每组术后1周,2周,4周斜板实验、BBB评分后,随机选取5只动物处死取材。2、模型制作:制作脊髓Allen’s打击的脊髓损伤模型。天麻素治疗组在损伤后即刻在蛛网膜下腔注射5mg(0.05ml)天麻素;以后腹腔内每日注射100mg/kg天麻素注射液,1周后停药。生理盐水治疗组给予等量生理盐水;假手术组不给药。3、行为学观察:各组大鼠在存活期间按不同时间点测定后肢运动功能(斜板实验及BBB运动功能评分)。4、形态学观察:在不同时间点取大鼠损伤脊髓做HE染色,光镜下观察脊髓组织的细胞形态与病理学变化情况。5、免疫组化:分别在损伤后1周、2周、4周处死动物,取出脊髓,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,切片,免疫组化染色观察各组动物神经元中BDNF的表达情况。结果1、行为学实验结果:所有大鼠脊髓Allen’s打击损伤模型制作均成功,5只大鼠在实验过程中死亡,随即进行了补充。斜板实验和BBB评分结果显示:第1周,天麻素组与生理盐水组差异无显著性;第2~4周,天麻素治疗组恢复明显较好,斜板实验和BBB评分显著高于生理盐水组,差异有统计学意义(p<0.01)。2、形态学观察结果:假手术组神经元形态完整,边界清楚,细胞核形状规则,细胞无肿胀。天麻素组,1周时明显可见神经细胞肿胀,神经组织形态紊乱;在第2周后,神经细胞状态逐渐改善,第4周时,可见形态较为正常的神经细胞,细胞碎片明显减少。生理盐水组,第1周明显可见细胞肿胀,而且随着时间的推移,细胞碎片逐渐增多,细胞肿胀逐渐增加。3、免疫组化染色结果:天麻素组较生理盐水组神经元中BDNF的表达明显增高。结论1.天麻素注射液对脊髓损伤后神经元中BDNF的表达具有促进作用。2.天麻素注射剂对脊髓损伤神经功能修复有治疗作用。