茄子花青素合成相关转录因子的研究

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花青素合成相关转录因子R2R3-MYB蛋白、bHLH蛋白和WD40蛋白结合形成一个三元复合体(简称MWB)调控植物花色苷合成相关路径、催化酶基因的表达、调控花色苷合成。目前在许多植物上已经有关于花青素转录因子的研究,但是对于茄子品种中花青素转录因子的研究还很缺乏。本实验利用光敏型茄子‘禾线’以及非光敏型茄子‘FGM’为材料,探究茄子中花青素合成相关的三元复合体的调控机制,主要研究结果与结论如下:1)以光敏型茄子‘禾线’茄为主要研究品种,克隆了与茄子花青素合成相关的三个转录因子SmTT8、SmGL3、SmTTG1,利用RT-PCR对三个基因在光敏型茄子‘禾线’中不同组织的表达分析结果显示,这三个基因在不同组织中都有表达,但表达水平具有组织特异性。2)亚细胞定位结果显示,SmTTG1定位于细胞质,SmTT8和SmGL3定位在细胞核和细胞质。双分子荧光互补实验表明SmTT8、SmGL3和SmTTG1均在细胞质中有互作。酵母双杂交实验表明,SmMYB1与SmGL3、SmTT8都存在相互作用。3)非生物逆境胁迫NaCl、ABA和低温处理茄子幼苗,结果显示,SmTT8、SmGL3与SmTTG1的表达量在各胁迫处理下均得到快速的上调。对茄子幼苗进行缺氮处理,SmGL3基因的表达水平在缺氮处理下有明显提高,而SmTT8和SmTTG1的表达水平没有显著变化。4)以‘FGM’茄子(非光敏型)和‘禾线’茄子(光敏型)为实验材料,应用Real-Time PCR技术,分析套袋处理对SmCOP1、SmTT8、SmGL3和SmTTG1表达水平的影响。结果表明,对于光敏型茄子,遮光处理后SmTT8、SmGL3基因的表达量显著降低,而SmCOP1基因的表达量显著上升,SmTTG1基因的表达量没有显著变化。对于非光敏型茄子,遮光处理后SmTT8、SmGL3和SmTTG1基因的表达量没有显著变化,而SmCOP1基因的表达量出现了明显的降低。光敏型不同的茄子中基因表达的不同可能与光照对花青素合成的调控有关。5)利用序列对比的方法探究光敏型茄子与非光敏型茄子之间在套袋遮光条件下基因表现差异的原因,结果显示,SmCOP1、SmGL3和SmTTG1基因的cDNA序列之间不存在任何差异。对于非编码区,在光敏型茄子和非光敏型茄子中,SmCOP1、SmGL3、SmTTG1基因的启动子之间不存在差异。
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