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目的:通过对大肠癌LS-174T细胞在人重组骨桥蛋白(rhOPN)刺激下增殖、侵袭及相关基因表达的体外实验研究,探讨骨桥蛋白在大肠癌中的作用。 方法:选择纳摩尔每升数量级的不同浓度rhOPN作用于人大肠癌LS-174T细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验检测细胞的增殖能力;重组人工基底膜实验评价细胞侵袭能力;并运用实时定量RT-PCR,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)作为归一化的管家基因,采用2-ΔΔCT相对定量的方法,分析细胞中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的相对水平。 结果:1、LS-174T细胞经纳摩尔每升数量级的不同浓度rhOPN干预24h后,相对于未处理组,处理组的MTT值均升高(P<0.01),并呈剂量依赖关系。2、Transwell上室加入5nmol/L、30nmol/L的rhOPN的后,穿膜的LS-174T细胞数均多于对照组(P<0.05),并呈剂量依赖关系。3、经5nmol/L、30nmol/L的rhOPN处理24h后,LS-174T细胞的uPA mRNA及VEGF mRNA的表达升高(P<0.05,P<0.01),而MMP-2 mRNA表达差异无显著性。 结论:rhOPN促进人大肠癌LS-174T细胞的增殖,并提高其侵袭能力。通过上调uPA mRNA的表达可能是rhOPN提高大肠癌LS-174T细胞的侵袭能力的分子机制之一,rhOPN上调LS-174T细胞VEGF mRNA的表达,提示OPN可能对大肠癌的血管生成具有影响。