论文部分内容阅读
红豆越橘中含丰富的有机酸、维生素、糖类和微量元素,还含有花青素、原花青素、黄烷醇、黄酮醇及其糖苷等活性成分,使红豆越橘具有抗氧化、抗癌、抵抗炎症等作用。目前,对红豆越橘生物活性的研究较少,其主要的开发和利用集中在果酒、饮料和果茶方面。本文主要以红豆越橘为研究对象,考究了它的抑菌成分,以及对不同微生物的抑制效果,同时进一步研究红豆越橘主要抑菌成分的抑菌机理,为红豆越橘进一步开发利用提供相关的理论依据。首先,以水和乙醇作为提取溶剂,对红豆越橘中的成分进行提取,经过初步的检测实验,证实了红豆越橘的提取液中含有氨基酸、蛋白质、糖类、酚类成分、黄酮及其甙类、生物碱、鞣质和蒽醌及其甙类等物质。并通过滤纸片法对红豆越橘提取物进行了初步的抑菌试验,后又采用对倍稀释法测得了红豆越橘水、乙醇提取物对供试菌的最低抑菌浓度(MIC)。红豆越橘水提取物对各供试菌的抑菌圈直径分别为:大肠杆菌17.3mm、枯草芽孢杆菌11.6mm、黑曲霉5.4mm和青霉6.0mm;MIC分别为:大肠杆菌31.25mg/mL、枯草芽孢杆菌62.5mg/mL、黑曲霉250mg/mL和青霉125mg/mL。红豆越橘乙醇提取物对各供试菌的抑菌圈直径分别为:枯草芽孢杆菌27mm,大肠杆菌20.6mm、黑曲霉5.9mm、青霉6.3mm;MIC分别为:大肠杆菌31.25mg/mL、枯草芽孢杆菌15.625mg/mL、黑曲霉125mg/mL和青霉62.5mg/mL。可见红豆越橘的乙醇提取物对供试菌的抑制作用强于水提取物。采用单因素和正交实验确定红豆越橘中总黄酮提取最佳条件为:超声波功率为450W、超声波处理时间为25min、乙醇水溶液浓度为50%、料液比为1:15,此条件下总黄酮提取率为29.87mg/g。当红豆越橘中总黄酮浓缩液的浓度为39.83mg/mL时对各供试菌的抑菌圈分别为:枯草芽孢杆菌21.67mm、大肠杆菌21.17mm、黑曲霉5.81mm和青霉6.10mm;MIC分别为:大肠杆菌5mg/mL、枯草芽孢杆5mg/mL、黑曲霉20mg/mL和青霉20mg/mL。而经中和后的红豆越橘总黄酮浓缩液(pH=7.0)对各菌株的MIC分别为:大肠杆菌400mg/mL、枯草芽孢杆菌600mg/mL,对黑曲霉和青霉没有明显抑制作用。采取响应曲面的设计方法,明确了红豆越橘中有机酸的最佳提取工艺:超声波功率150W,超声波处理温度70℃,溶剂浓度为10%的乙醇水溶液,料液比为1:25,提取时间为40min。当其有机酸提取浓缩液的浓度为1.275g/mL时,有机酸对大肠杆菌的MIC为7.969mg/mL、枯草芽孢杆的MIC为15.938mg/mL、黑曲霉的MIC为63.75mg/mL和青霉的MIC为31.875mg/mL。通过超微结构观察和生化等试验,研究红豆越橘有机酸浓缩液的抑菌机理。有机酸浓缩液导致供试菌的离子及小分子物质漏出;各供试菌菌体对还原糖的利用能力下降、可溶性蛋白质大量溶出;细胞表面出现褶皱变形,部分出现溶胀破裂。