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目的:本文拟采用大鼠心脏缺血-再灌注模型,对mitoKATP正常、缺血、mitoKATP开放与阻断四种状态心肌细胞miRNA和基因表达模式进行分析,筛选和鉴定mitoKATP不同状态下的特征miRNA;利用生物信息学等方法分析特征mi RNA介导的调控网络及其关键节点,获得mitoKATP介导的抗MIRI与miRNA调控网络,为临床预防和治疗MIRI的研究提供新的理论依据。方法:标准健康SD大鼠,体重250-300克,予以戊巴比妥钠对大鼠行腹腔注射麻醉,麻醉完成后将大鼠用平板固定,沿着肋骨边缘迅速剪开腹壁暴露膈肌后剪下心脏,建立大鼠离体心脏Langendorff灌注模型,将48只大鼠随机分为4组:N组、I/R组、DZ组、5HD组,每组12只。N组:K-H液持续逆灌120min。I/R组:K-H液逆灌并平衡20min后,心肌缺血30min后,再复灌70min。DZ组:K-H液逆灌并平衡20min后,心肌缺血30min后,停灌末后立刻给予mitoKATP特异性开放剂二氮嗪（Diazoxide,DZ）灌注5min。5HD组:K-H液逆灌平衡20min,心肌缺血25min后,停灌末立刻给予mitoKATP特异性阻滞剂五羟基葵酸（5-Hydroxy decanoic acid,5HD）灌注5min后再继续给予二氮嗪灌注5min。上述分组除N组外,均在平衡20 min后调整冠脉流量使平均灌注压维持在6070 mmHg之间,于平衡末停灌,32℃全心缺血30 min后,继续灌注37℃含氧K-H液70 min,使平均灌注压维持在6070 mmHg之间。检测指标:（1）在平衡末和复灌末分别观察和记录各组心脏心功能指标;（2）在复灌末,用TTC染色检测心肌梗死面积;（3）在复灌注末将左心室心肌组织取下迅速放入液氮中冻存,各组每4个心脏混合为一个样本,即每组3个样本。TRIzol法提取心肌总RNA。将12个样本（4组×3个样本/组）mRNA和miRNA碎片化处理后,构建测序文库。Illumina测序平台测序;（4）选取差异表达的miRNA,用qRT-PCR技术验证测序结果可靠性;（5）通过Gene Ontology、KEGG Pathway等数据库分析差异基因所在的生物调控通路及网络。结果:（1）在再灌末,除HR外,LVDP、LVEDP、CF以及+dp/dtmax等指标在各组间比较均有显著差异。（2）与N组相比,I/R组的心肌梗死面积显著增多（P<0.05）;DZ组心肌梗死面积比I/R组显著降低（P<0.05）;5-HD组心肌梗死面积比DZ组显著增多（P<0.05）。（3）测序结果显示,与N组比较,I/R组上调miRNA有192个,下调的miRNA为77个;与I/R组比较,DZ组上调的miRNA为118个,下调的为48个;与DZ组比较,5-HD组上调的miRNA为37个,下调的为123个。（4）选取在各组间具有显著性差异表达的且表达量高的17个miRNA,利用qRT-PCR进行验证,其中8个mi RNA的qRT-PCR结果同样在各组间具有显著性差异,分别为:rno-miR-328a-3p、rno-miR-676、rno-miR-128-3p、rno-miR-30c-5p、rno-miR-30d-5p、rno-miR-148a-3p、rno-miR-novel-chr559812、rno-mi R-novel-chr1-36162。（5）通过Gene Ontology、KEGGPathway等数据库分析上述8个miRNA及可能调控的mRNA的调控通路及网络。结论:（1）二氮嗪后处理对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,使用5-HD处理后会使心肌缺血再灌注损伤加重,结果显示mitoKATP通道在心肌缺血再灌注损伤中十分重要;（2）通过测序技术及qRT-PCR方法,选出9个候选mi RNA,其中miR-128、miR-328a-3p、miR30d-5p、miR-30c以及miR-676、mi R-361可能参与调控mitoKATP通道对心肌缺血再灌注损伤的作用机制。