论文部分内容阅读
[目的]
观察二氧化碳(CO2)气腹对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株(SKOV-3)在裸鼠体内生长增殖及所形成的卵巢癌移植瘤组织中转移抑制基因(nm23-H1)和基质金属蛋白酶-2基因（MMP-2）表达的影响，并分析二者之间的相关性，以期探讨CO2气腹对肿瘤生长和转移的影响及其机制，为临床上腔镜手术用于治疗卵巢恶性肿瘤提供实验依据。
[方法]
采用腹腔注射卵巢癌细胞株SKOV-3建立裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤模型，随机分为四组，每组10只裸鼠:单纯麻醉对照组(仅麻醉，手术时间30min)、开腹手术组(麻醉后开腹，手术持续30min)、CO2气腹0.5h组(麻醉后建立CO2气腹持续时间为30min)、CO2气腹1h组(麻醉后建立CO2气腹持续时间为60min)，术后饲养12周，处死裸鼠，首先观察四组裸鼠腹腔肿瘤生长情况，然后收集肿瘤组织，采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和免疫组化SP法检测癌组织中nm23-H1和MMP-2的mRNA和蛋白表达情况。实验数据以均数±标准差((x)±s)表示，采用SPSS17.0软件进行统计学分析，各组间肿瘤生长情况与基因表达情况采用卡方检验、单因素方差分析(One-way ANOVA)，两两比较采用LSD进行多重检验;相关性分析采用Spearman秩相关分析和Pearson积差相关分析方法。
[结果]
①裸鼠腹腔肿瘤重量:开腹组与对照组腹腔肿瘤平均重量没有明显差异(P＞0.05)，但CO2气腹0.5h组和1h组明显高于开腹组或对照组，且差异有统计学意义(P＜0.05)。
②nm23-H1和MMP-2蛋白表达结果:对照组和开腹组nm23-H1和MMP-2的阳性表达无统计学差异(P＞0.05);CO2气腹组nm23-H1的阳性率均低于对照组，而MMP-2的阳性率均高于对照组，且差异都有统计学意义(P＜0.05);开腹组与CO2气腹0.5h组nm23-H1和MMP-2的表达无统计学差异(P＞0.05)，但与CO2气腹1h组nm23-H1和MMP-2的表达差异有统计学意义(P＜0.05);CO2气腹不同时间nm23-H1和MMP-2的表达无统计学差异（P＞0.05）;另外，nm23-H1和MMP-2的蛋白表达水平成负相关（r=-0.445，P＜0.01）。
③nm23-H1和MMP-2的mRNA表达结果:对照组和开腹组nm23-H1和MMP-2的表达无统计学差异(P＞0.05)，CO2气腹组nm23-H1的表达明显低于对照组和开腹组，而MMP-2的表达明显高于对照组和开腹组，且差异均有统计学意义(P＜0.01)。CO2气腹不同时间的两组nm23-H1和MMP-2的表达有显著性统计学差异(P＜0.01)。另外，nm23-H1和MMP-2的mRNA表达水平具有相关性，成负相关(r=-0.984，P＜0.05)。
[结论]
①CO2气腹对人卵巢癌SKOV-3细胞的生长增殖有促进作用，且肿瘤的增殖与CO2气腹作用时间相关。
②CO2气腹能使抑癌基因nm23-H1的表达下调，从而促进卵巢癌细胞的转移，且癌细胞的转移能力与nm23-H1的表达量成反比，与气腹作用时间成正比。
③CO2气腹能使基质金属蛋白酶MMP-2的表达上调，从而促进卵巢癌细胞的转移，且癌细胞的转移能力与MMP-2的表达量及气腹作用时间均成正比。
④在卵巢癌移植瘤组织中，nm23-H1和MMP-2的表达量成负相关。