海菖蒲的化学成分分析及生物活性的初步研究

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海菖蒲(Enhalus acodoides)为单子叶水鳖科海草,分布于我国东南沿海一带。本文对采自海南岛琼海的海菖蒲进行了化学成分分析及部分生物活性研究。运用各种分离纯化手段及物理化学方法从海菖蒲中分离得到单体化合物并应用波谱手段鉴定其结构。本文还对海菖蒲粗提物、多糖及部分单体化合物进行了抑菌、抗柯萨奇B3病毒(CVB3)、抗单纯疱疹1型病毒(HSV-1)等活性研究,另外还进行了粗多糖促进胰岛素分泌的初步研究实验。 本文采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、薄层层析、制备型HPLC等分离手段结合传统的萃取、重结晶等方法从海菖蒲样品中分离得到10个化合物,鉴定了其中8个,分别为木犀草素(E-1)、金圣草素(E-2)、2-(2,5-二羟基苯基)-色满-3,5,7-三醇(E-3)、豆甾醇-3-β-D-吡喃葡萄糖苷(E-4)、对羟基苯甲酸(EⅡ-5),1-甲基-3羟甲基哌啶(E-5)、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸(E-1)、金圣草素-7-O-葡萄糖醛酸(E-2)。8个化合物均为首次从该属植物中分离得到。 本文采用直接水提法对海菖蒲多糖进行提取。采用Sevag法进行除蛋处理并应用紫外吸收法测定蛋白质含量。分别采用蒽酮-硫酸法、BaCl2-明胶法、GC-MS法等测定了海菖蒲多糖的总糖含量、硫酸基含量及单糖组成。 本文采用微量稀释法测定了海菖蒲不同极性部分的粗提物、粗多糖及部分纯化合物对金黄色葡萄球菌等6种菌的最低抑菌浓度(MIC),探讨海菖蒲的体外抑菌活性。发现海菖蒲高极性部分的粗提物对革兰氏阳性菌具有良好的抑菌效果,其中直接水提物(EW)对金黄色葡萄球菌的MIC为0.156mg·mL-1。 本文采用MTT比色法及细胞病变(CPE)法测定海菖蒲不同极性部分粗提物、粗多糖及部分纯化合物体外对CVB3及HSV-1的半抑制浓度(IC50)。实验结果表明直接水提物(EW)及粗多糖(EP)对两种病毒均具有良好的抑制效果。粗多糖对CVB3及HSV-1的半抑制浓度分别为3.908μg·mL-1、15.63μg·mL-1。直接水提物(EW)对CVB3及HSV-1的半抑制浓度皆为15.63μg·mL-1。 本文采用体外培养法对海菖蒲多糖(EP)进行初步的促进胰岛素分泌实验,虽然效果不明显,但海菖蒲多糖对胰岛细胞的毒性很小,考虑进行测定海菖蒲多糖对高糖损伤下的胰岛细胞的修复作用的研究测试。
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