原油污染对生态环境和人类健康构成的威胁和危害不可忽视。微生物修复治理技术是较为经济、高效、环保的方法。具有原油降解功能的微生物单菌存在降解物质较为单一、高效菌较难筛选、适应性差等缺陷。原油降解菌复合系的构建则是一种先确定功能微生物群,后应用于解决环境污染的策略,具有种类多、功能性强、经济效益高、数据量大等特点。因此,筛选出功能稳定的原油降解微生物菌群,对于直接用于原油污染问题的处理,或进一步研究其内部相互作用具有重要的意义。本试验取样于被原油污染的土壤,从中筛选出一组原油降解率约25%且多代降解效果稳定的微生物菌群,其研究结果如下:(1)利用原油作为唯一碳源富集驯化培养,在6组复合系中获得一组原油降解率较高且稳定性好的复合系,并对其进一步研究,将此复合系命名为复合系T-3。(2)通过单因素试验和响应曲面法优化原油降解条件,其条件是:温度为38.61℃,p H为6.63,油菌比为1∶6.17。在该条件下,复合系T-3经实验验证对原油的降解率为34.21%,是优化前的1.36倍。(3)Tween-80和Triton-100两种非离子表面活性剂都能够促进复合系T-3对原油的降解,其中Tween-80对原油降解的影响较大,Tween-80在发酵条件下的含量达到0.30%时的原油降解率为51.92%,是最佳优化条件下的1.51倍。(4)通过检测原油降解过程中两种关键的双加氧酶的比活力和脱氢酶的比活力,其在原油降解过程中三种酶酶活逐步减弱的变化趋势基本一致。(5)通过对复合系T-3进行平板分离和功能筛选得到具有一定降解功能的菌株,经16S r DNA分子鉴定,发现10株细菌分布于赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus sp.)和柠檬酸细菌属(Citrobacter sp.)之中,其中柠檬酸细菌属所占比例较大,推测可能为复合系T-3中的优势菌种。通过对复合系T-3降解原油条件的优化,最终原油降解率可达51.92%。经过初步多样性分析表明复合系T-3是以细菌为优势的微生物菌群,具有赖氨酸芽孢杆菌和柠檬酸细菌,有望应用于原油污染的生物修复。