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西红花(Crocus sativus)是鸢尾科番红花属球根类多年生无茎草本植物,是我国传统名贵中药材,具有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神、抗癌防老等功效。市场需求的日益增加,导致人工栽培面积逐年上升,2015年浙江省西红花种植面积6000多亩,约占全国西红花种植面积的50%,其中建德市种植面积最大,约3000亩左右。随着设施栽培规模的扩大和多年的无性繁殖,西红花病害逐年严重。经调查,西红花球茎腐烂病尤为严重,可导致产量下降60%以上,同时品质也受到影响。为此本文对西红花球茎腐烂病的田间病害、生防菌筛选及抗菌物质等方面进行了研究,具体结果如下:1、通过对浙江建德西红花产区球茎腐烂病病害样本的采集和病原菌分离,以及形态学观察、ITS序列分析和TEF-1 α序列分析,鉴定出引起西红花球茎腐烂病的病原菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的ZJU-1菌株和茄病镰刀菌(Fusarium solani)的 ZJU-2 菌株。2、从建德市三都镇西红花种植基地的根围土壤中筛选得到的一株防治西红花球茎腐烂病的生防菌株C612,经过形态学观察、16SrDNA序列分析,Gyrb基因序列分析,最终鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)C612。盆栽试验结果表明,解淀粉芽孢杆菌C612对西红花球茎腐烂病的两种病原菌F.oxysporum ZJU-1和F.solani ZJU-2的生防效果分别为52%和40%,对两种镰刀菌混合侵染的生物防效为46%。此外,解淀粉芽孢杆菌C612也可促进西红花的株高、根长、鲜重及球茎个数的增加。3、通过对解淀粉芽孢杆菌C612的胞外抗菌粗提物的稳定性和抗菌谱测定,结果表明:菌株C612的胞外抗菌粗提物具有耐酸碱、耐高温的特性,对蛋白酶不敏感,对8种病原真菌都具有拮抗作用。这与已报道过的芽孢杆菌产生的脂肽类抗生素的性质吻合,因此利用检测脂肽类抗生素合成基因的四对特异性引物mycb、fenb、sfp、ituA对菌株C612菌液进行检测。PCR扩增结果显示解淀粉芽孢杆菌C612中含有脂肽类抗生素合成基因ttuA和fenB,说明解淀粉芽孢杆菌C612的胞外产物中可能含有脂肽类抗生素iturinA和fengycin。同时,通过平板法测定,解淀粉芽孢杆菌C612可产生蛋白酶、纤维素酶、几丁质酶,但是不产生噬铁素。4、根据脂肽抗生素的理化性质、参考报道的分离纯化方法,本论文对解淀粉芽孢杆菌C612发酵液活性物质进行提取,获得的粗提物质通过硅胶柱层析和薄层析层析进行分离纯化,得到活性物质38.4mg。利用HPLC-MS和iturinA标样对活性物质进行检测分析,结果表明活性物质中含有iturinA同系物C14-iturinA、C1 s-iturinA、C16-iturinA。本研究明确了导致建德市西红花球茎腐烂病的病原菌并从根围土壤中筛选到一株抗球茎腐烂病的解淀粉芽孢杆菌C612,在此基础上对其生化特性、抗菌活性及西红花生防作用进行的探索,为该菌株作为生物农药的生产与应用提供了理论基础和技术支持。