论文部分内容阅读
目的检测槐耳颗粒对雌激素受体不同表达状态的人乳腺癌细胞的影响,并研究其可能的作用机理。方法体外培养MCF-7（ER+）和MDA-MB-231（ER-）人乳腺癌细胞，采用不同浓度的槐耳颗粒（1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml）处理该细胞；运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察其对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖的影响；倒置显微镜观察细胞形态；流式细胞术测定细胞周期；膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)+碘化丙啶(PI)双参数检测细胞凋亡状况。结果（1）MTT法显示槐耳颗粒可明显抑制MCF-7和MDA-MB-231人乳腺癌细胞的生长,随着药物浓度和作用时间的增加，抑制作用逐渐增强，呈时间-剂量效应关系（P<O.05）；8mg/ml槐耳颗粒作用细胞72小时，MCF-7细胞的抑制率达80.10％；MDA-MB-231细胞的抑制率达76.42％；但相同药物浓度、相同时相时两种细胞的抑制率无统计学差异。（2）槐耳颗粒作用MCF-7和MDA-MB-231细胞48h后，倒置显微镜下可见两种细胞随作用浓度增加形态逐渐改变。空白对照组细胞均贴壁良好，MCF-7乳腺癌细胞形态呈多边形，MDA-MB-231细胞大部分为圆形或梭形，细胞质均匀，细胞间紧密连接成片；而实验组随槐耳颗粒作用浓度的增加，细胞状态趋差，贴壁细胞逐渐减少，胞质内颗粒物质增多，体积缩小，皱缩变圆，细胞之间不能连接成片而出现空隙，培养液中可见大量死亡脱壁细胞。（3）经槐耳颗粒处理的MCF-7和MDA-MB-231细胞周期发生明显变化，随着浓度的增加，细胞周期中的Gl期细胞比率逐渐增高，G2和S期细胞比率下降，与各对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。槐耳颗粒处理72h后，MCF-7细胞的G1期占细胞总数的69.82%；MDA-MB-231细胞G1期占细胞总数的71.79%。（4）Annexin V/PI双染结果显示:与各对照组相比，MCF-7和MDA-MB-231细胞的早期凋亡率均有显著性差异(P<0.05)，随加药浓度、作用时间的增加凋亡率明显增高，呈时间-剂量效应；但相同组间、相同时相时两种细胞凋亡率无统计学差异。结论（1）槐耳颗粒对体外培养的MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞有抑制增值及诱导凋亡的作用，且均存在剂量-时间效应关系。（2）槐耳颗粒可抑制两种细胞的周期在G1期。