前言 在过去几十年里各国采取不同措施改善环境铅污染,但铅仍然普遍存在于生物圈内,据美国公共卫生管理局和环保局目前的调查估计每年约成百万的美国儿童及成千上万的工人继续暴露于有毒的铅水平,铅毒性仍是一个重要的公共健康问题。骨骼是摄入铅的主要贮存库,铅在骨骼内的蓄积在胎儿骨发生时就开始然后终生持续。过去人们普遍认为铅对骨骼是没有毒性的。但越来越多的临床和流行病学和实验研究显示铅的贮存可能对骨有重要的损害效应,并最终导致骨骼病理学改变,即骨骼也是铅毒性重要的靶器官。 铅对骨的毒性影响机制尚不清楚,骨内细胞在全身和局部因素的调节下,对骨基质形成、矿化及骨吸收起重要作用。其中成骨细胞起关键作用。一旦成骨细胞生成不足或功能降低将直接影响骨骼的功能造成骨骼的病理学改变。铅对成骨细胞的毒性作用可能是铅发挥骨骼毒性的重要环节。目前国外对成骨细胞铅毒性的研究绝大多数采用单克隆的成骨细胞瘤细胞系,未见用原代成骨细胞者。国内关于铅的骨毒性研究只限于一些流行病学调查。原代成骨细胞是机体活性细胞与体内成骨细胞一样,故对研究铅对机体成骨细胞的毒作用乃至对整个骨骼系统的影响有着重要的意义。为了阐明铅对成骨细胞的确切影响,本研究采用原代细胞培养方法观察铅对成骨细胞各项指标的影响,并观察了铅对其凋亡相关基因表达情况及电镜结构的影响,为进一步研究铅对骨骼系统的毒性作用及作用机制提供重要的理论依据和线索。 材料与方法 1.成骨细胞的分离培养纯化及鉴定