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目的:研究模拟在脊髓损伤的微环境中,Taxol与Y27632联合应用对新生SD (Sprague Dawley,SD)大鼠背根神经节神经元的轴突生长的影响。方法:①21只SD大鼠随机分为对照组7只,手术组7只(用改良Allen法制作雌性成年SD大鼠T9平面完全性截瘫模型),假手术对照组7只。制模后7天后取出T8～T10段脊髓,并经过分离、过滤形成组织匀液制备脊髓萃取液。②分离、培养以及鉴定新生SD大鼠的背根神经节神经元(dorsal root ganglion neurons, DRGNs)。③分组培养、观察脊髓萃取液对DRG神经元轴突生长,分别为:A组DRGNs+50μlPBS,B组DRGNs+50μl假手术组脊髓萃取液,C组DRGNs+50μl损伤脊髓萃取液,D组DRGNs+50μl对照组脊髓萃取液。培养2d后,各组于倒置显微镜下测量轴突生长的平均长度,然后运用免疫荧光染色技术,测量轴突远端微管荧光平均密度。实验2: DRGNs、脊髓萃取液分别和共同与Y27632,Taxol培养、DRG神经元轴突生长。共分为五组,A组为DRGNs+50μlPBS,B组为DRGNs+50μl脊髓萃取液(假手术组);C组为DRGNs+50μl完全性截瘫大鼠脊髓萃取液+3nM Taxol,D组为DRGNs+50μl完全性截瘫大鼠脊髓萃取液+30μM Y27632; E组,DRGNs+50μl完全性截瘫大鼠脊髓萃取液+3nM Taxol+30μMY27632。培养1d,2d后于倒置显微镜下测量轴突生长的平均长度,然后运用免疫荧光染色技术,测量轴突远端微管荧光平均密度。结果:①实验1:共同培养2d后,各组轴突生长平均长度:A组为 142.1 ±5.7μm,B组为 144.8±3.1μm,C组为47.2±3.5μm,D组为136.9±4.2μm。单因素方差分析示:C组和A、B、D组之间,P<0.01,有显著的统计学差异;轴突远端平均微管荧光密度,A组为175.1±2.9 AFU/μm,B组为 191.6±3.1 AFU/μm,C组为64.5± 1.5 AFU/μm,D组为 174.8±3.1AFU/μm。C组和A、B、D组相比较,P<0.01,有明显的统计学差异。②实验2:共同培养1d后,各组轴突平均长度:A组为136.5±4.6μm,B组为47.6±3.9μm,C组为 137.9±5.2μm, D组为 158.6±4.6μm,E组为 181.2±5.2μm,单因素方差分析示: B组和A、C、D及E组相对比,P<0.01,有显明的统计学上的差异。2d后,轴突平均长度,A组为142.9±1.4μm,B组为44.5±2.2μm,C组为152.6±5.3μm,D组为168.1±3.1μm,E组为194.6±3.2μm。单因素方差分析示:B组与A、C、D及E之间,P<0.01,有明显的统计学差异。C组和D、E组相比较,P<0. 05,有明显的统计学差异。E组和A、B、C、D组相比较,P<0.01,有明显的统计学差异;A组与C组之间,P>0. 05,两者无统计学差异。轴突远端平均微管荧光密度,A组为181.8±3.4AFU/μm,B组为61.6±2.7AFU/μm,C组为205.2±2.1AFU/μM, D 组为 401.2±3.5 AFU/μM,E组为470.2±3.6AFU/μm。B组和A、C、D、E组相比较,P<0. 01,有明显的统计学差异。E组和A、B、C、D组相比较,P<0. 01,有明显的统计学差异;C组与E组之间,P>0. 05,两者无统计学差异。结论:①DRGNs置于完全性截瘫大鼠脊髓萃取液中培养,其轴突的再生和延长受到抑制,经过前期实验结果,证实完全性截瘫大鼠脊髓萃取液能模拟脊髓损伤的微环境,抑制新生SD大鼠DRGNs轴突的生长;②单独使用适合剂量的Taxol与Y27632能积极地增进DRGNs轴突生长,由于生长锥形成。联合应用Taxol与Y27632对新生大鼠DRGNs轴突生长促进作用效果比单一应用更为有效,形成多个分支、甚至神经网。