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奶牛乳房炎的发病率高,损害严重,难以治疗.研究HSP72和IRAK-M对奶牛乳腺上皮细胞TLR4信号转导机制的抑制作用,可以进一步揭示乳腺炎的分子调控网络,为筛选抗乳腺炎分子药物提供新的理论依据.将培养的乳腺上皮细胞随机分为4组:对照组,LPS组,HSP72组和HSP72+LPS组.用免疫组织化学染色法、实时荧光定量PCR法和Westernblot法鉴定奶牛乳腺上皮细胞内相关因子蛋白和mRNA相对表达量;通过ELISA法测量炎性因子的相对表达.研究结果表明,与对照组相比,LPS组IRAK-M、TRAF6、IRAK-1、IRAK-4、A20和Tollip蛋白和mRNA相对表达量显著(P＜0.05)升高,I-κB和p65的蛋白表达量显著(P＜0.05)降低,p-p65的蛋白表达量显著(P＜0.05)增加,炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-13表达量显著(P＜0.05)升高.与对照组相比,HSP72组和HSP72+LPS组IRAK-M、TRAF6、A20和Tollip蛋白和mRNA相对表达量显著(P＜0.05)升高,炎性因子IL-10和IL-13表达量显著(P＜0.05)升高;与LPS组相比,HSP72组和HSP72+LPS组IRAK-1和IRAK-4蛋白和mRNA相对表达量显著(P＜0.05)降低,I-κB和p65蛋白的相对表达量显著(P＜0.05)增加,p-p65蛋白的相对表达量显著(P＜0.05)减少,细胞炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8表达量显著(P＜0.05)降低.上述结果表明,LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞炎性反应,而HSP72可以上调IRAK-M表达,抑制TLR4/NF-κB信号通路,达到保护乳腺上皮细胞的作用.