肿瘤是威胁人类生命的重大疾病之一，目前肿瘤的治疗方案主要有手术、放疗、化疗和免疫治疗，这些方法对肿瘤早期都有一定的疗效，然而对于许多肿瘤患者，确诊时常常已是晚期而难以治疗。由于肿瘤严重危害人类健康，各国学者都在致力于预防和治疗肿瘤的研究。细胞生物学、肿瘤生物学和免疫学等理论发展日新月异，特别是在肿瘤的致病机理的研究上近年又有了新的理论突破，即肿瘤干细胞(Tumor Stem Cell，TSC)假说的提出。 最新研究认为肿瘤是一种干细胞疾病，是由极少数具有成瘤能力的细胞增殖发育而成的异常组织。这些具有成瘤能力的细胞数量虽少，但却具有干细胞特征，可无限增殖，并可进行不对称分裂等，故称之为TSC。 目前国内外有许多学者正在致力于TSC的研究，且已经取得一些成果，一些肿瘤的TSC已被分离鉴定出来，如急性髓性白血病、乳腺癌、脑肿瘤、前列腺癌、人恶性黑色素瘤等。 由于对肿瘤的治疗研究，一般是先在动物肿瘤模型上进行。所以，分离与鉴定动物肿瘤TSC对开展TSC的基础和临床研究均有重要意义。为此，我们选择小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)，对其TSC进行了相关的分析研究。 目的： 根据人源性肿瘤细胞与动物源性肿瘤细胞有诸多相似的生物学特性，本研究探讨SP2/0细胞中TSC存在与否，并对可能存在的TSC的分离鉴定方法进行探索。 方法： 1.通过克隆形成试验、溴脱氧尿嘧啶核苷(Bromodeoxyuridine，Brdu)标记滞留试验，探讨SP2/0细胞中TSC存在与否。 2．探索SP2/0细胞中TSC的鉴定方法： (1)用无血清培养基(Free serum medium，FSM)培养SP2/0细胞，并应用SP细胞检测法、MTT法、体内致瘤等方法比较这种条件下所得肿瘤细胞与普通培养肿瘤细胞在生物学特性上有何异同； (2)通过磁珠分离技术筛选小鼠骨髓瘤TSC的特异性标志，并进行相关生物学鉴定，如致瘤结果： 1.在克隆形成试验中，SP2/0细胞中有一部分细胞具有形成克隆的能力。 2.BrdU标记滞留实验证明了SP2/0细胞中含有DNA永生化链的细胞，即TSC。 3.sP细胞检测结果进一步证明了SP2/0细胞中TSC存在的事实。 4．无血清培养方法可以富集SP2/0细胞中的TSC。 5.由磁珠分离和动物致瘤性试验可得：CD133和CD44分子可能不是SP2/0细胞中TSC的标志；而CD24分子可能是SP2/0细胞中TSC的标志。 结论： SP2/0细胞中存在TSC，它们可以通过用无血清培养的方法得到富集，但其表面特异性标志还未获得明确鉴定。但值得注意的是，CD24<->的SP2/0细胞在小鼠体内的致瘤性比CDl33<+>、CD44<+>、CD24<+>的SP2/0细胞要强，所以SP2/0细胞TSC的标志之一可能是CD24<－>。