miRNAs在肝癌中的表达及临床意义

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:niannian827
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目的:通过比较miRNAs在具有不同转移能力的肝癌细胞株MHCC97-H(高转移)和MHCC97-L(低转移)中的表达差异,分析miRNAs与肝癌生物学特征的相关性及其在肝癌中表达的临床意义,从而为进一步提高肝癌的诊断及治疗效果提供新的策略及依据。方法:(1)RNAs芯片技术对具有不同转移能力的细胞株MHCC97-H(高转移)和MHCC97-L(低转移)中的miRNAs的表达情况进行分析,找出差异表达miRNAs,应用q RT-PCR技术在人肝癌高低转移细胞株及肝癌和癌旁组织中验证基因芯片的结果,初步探讨miRNAs在肝癌中的表达及临床意义。(2)应用靶基因预测网站对差异表达的miRNAs的靶基因进行预测,根据预测结果选取差异的miRNAs进行进一步的研究。(3)分别上调和下调所选取的miRNAs的表达水平,利用体内、外实验检测改变前后肝癌细胞的生物学行为,进一步探讨miRNAs在肝癌中表达的临床意义。(4)干扰和过表达miRNAs的靶基因,改变其在肝癌细胞中的表达水平,体内、外实验检测改变前后肝癌细胞的生物学行为,明确miRNAs影响肝癌转移的机制。结果:(1)有13个miRNAs在转移能力不同的肝癌细胞株中的表达存在差异,应用q RT-PCR技术对肝癌及其相邻的癌旁组织中miRNAs的进行检测所得结果与在细胞株检测的结果基本一致。(2)基因预测网站预测miR-26a-2-3p,miR-548l和miR-34a-5p具有共同的靶基因ST3GAL5,荧光素酶实验对预测结果进行了证实。(3)上调miR-26a-2-3p,miR-548l和miR-34a-5p的表达水平能够降低MHCC97-H细胞的增殖活性,集落形成数量,侵袭能力及体内成瘤性,下调miR-26a-2-3p,miR-548l和miR-34a-5的表达水平则增强MHCC97-L细胞的增殖活性,集落形成数量,侵袭能力及体内成瘤性。(4)上调ST3GAL5的表达水平增强MHCC97-L细胞的侵袭能力及体内成瘤性,干扰ST3GAL5的表达水平能够降低MHCC97-H细胞的侵袭能力及体内成瘤性。结论:(1)miRNAs在转移能力不同的肝癌细胞株中存在差异的表达,miR-26a-2-3p,miR-548l和miR-34a-5p与肝癌的侵袭能力呈负相关。(2)miR-26a-2-3p,miR-548l和miR-34a-5p可能通过负向性调控糖基因ST3GAL5的表达来影响肝癌的侵袭能力。
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