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研究目的：随着医疗水平的提高，早产儿的生存率明显增加，但早产儿视网膜病变(retinopathy ofprematurity，ROP)的发生率也随之上升，成为导致婴幼儿视力损伤和失明的主要原因之一。目前，ROP发病的关键作用因子和作用途径尚未完全发现，全身因素对ROP的影响尚处在发现阶段，没有寻找到它们之间的本质联系。已研制出多种新生血管(neovasculariztion，NV)抑制剂，但其治疗方式终究是被动的，主要是针对NV并发症的治疗，可以延缓但不能最终治愈ROP。因此，本研究旨在通过建立甲巯咪唑(Methimazole，MMI)及高氧诱导的新生幼鼠模型，进一步阐明ROP的发病机制，以期达到早期防治、控制NV及其所引起的一系列病理改变的目的。研究方法：第一部分：健康成年SD大鼠配对后将同一天出生的幼鼠在24小时内混合，称重后随机分成扩大的25只／窝，由一只母鼠饲养，平均分配每窝的弱小鼠。实验组(MMI组)新生幼鼠75只，母鼠分娩后第一天即饮用含0.1％MMI的水，新生幼鼠通过吸吮乳汁间接暴露于MMI。分别在生后第4天(P4)、第10天(P10)处死幼鼠。对照组新生幼鼠50只，母鼠饮用普通自来水，同样于P4、P10天处死。处死幼鼠后，分别进行视网膜组织ADP酶染色及内界膜前新生血管计数，评估新生血管生成情况，同时行视网膜组织IGF-1mRNA分析、视网膜血管密度及血管化程度测定；放射免疫法(radioimmunity，RAI)测定血清IGF-1含量，并每天测量体重。第二部分：同一天出生的幼鼠在24小时内混合，称重后随机分成12只／窝，由一只母鼠饲养。40／15％循环氧组(40／15组)：新生幼鼠24只，出生后的幼鼠(P0)与哺乳母鼠一起放入密闭的玻璃容器内，通入100％湿润医用纯氧气和氮气的混合气体，使氧气浓度在40％和15％间循环波动(自P0到P14天每隔24h气体循环波动一次)，饲养14天后，返回正常空气环境中继续饲养4天，母鼠饮用普通自来水。正常对照组(C组)：24只幼鼠置于空气环境下饲养，母鼠饮用普通自来水。0.1％MMI组(C+MMI组)：饲养于空气环境下的幼鼠24只，母鼠分娩后第一天即饮用含0.1％MMI的水，新生幼鼠通过吸吮乳汁间接暴露于MMI。40／15％循环氧+0.1％MMI组(40／15+MMI组)：40／15％循环氧组试验条件下的母鼠饮用含0.1％MMI的水，幼鼠(24只)通过吸吮乳汁间接暴露于MMI。各组幼鼠均于P18天处死，取视网膜后分别行视网膜新生血管分析、视网膜血管密度及血管化程度测定、血清IGF-1测定，并每天测量体重。第三部分：同一天出生的大鼠在P0天分成扩大的25只／窝，随机分成两组：MMI组和rhIGF-1治疗组。母鼠分娩后第一天即饮用含0.1％MMI的水。其中75只大鼠自生后第一天(P1)始，每隔6h皮下注射10gl重组的人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)，注射剂量为2.0mg／kg／d，连续注射3天，为rhIGF-1治疗组；其余75只大鼠皮下注射等剂量的生理盐水，为MMI组。分别在P4、P10天处死大鼠，行视网膜新生血管分析、视网膜血管密度及血管化程度测定，同时行血清IGF-1水平分析，并每天测量体重。研究结果：1．新生血管发生率和严重程度第一部分：ADP酶染色视网膜铺片显示：10天MMI组新生血管的发生率高于10天对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。视网膜内界膜前血管内皮细胞核计数：10天MMI组明显大于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。第二部分：40／15+MMI组NV的发生率明显高于40／15组，差异有统计学意义(P＜0.05)；两组内界膜前血管内皮细胞核数目相比，差异有统计学意义(P＜0.05)。第三部分：10天rhIGF-1组内界膜前内皮细胞核数目少于MMI组，差异有统计学意义(P＜0.05)。2．视网膜血管化程度第一部分：4天MMI组同年龄相匹配的对照组相比，视网膜无血管区占整个视网膜面积的比值明显增大，差异有统计学意义(P＜0.05)。视网膜无血管区占整个视网膜面积的比值在10天MMI组及10天对照组相似。第二部分：C组、40／15及C+MMI组视网膜发育至周边部，未见明显的无血管区。40／15+MMI组视网膜无血管区占整个视网膜面积的6.37％。第三部分：4天rhIGF-1组同4天MMI组相比较，无血管区占整个视网膜面积的比值减少，但差异无统计学意义。3．视网膜血管密度第一部分：MMI组同年龄相匹配的对照组相比，视网膜毛细血管密度减少，差异有统计学意义(P＜0.05)。第二部分：C组、C+MMI组、40／15组及40／15+MMI组间视网膜血管密度比较，差异有显著性(P＜0.05)，组间两两比较，差异有显著性(P＜0.05)。第三部分：4天rhIGF-1组同4天MMI组相比较，视网膜毛细血管密度增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。4．血清IGF-1含量第一部分：4天MMI组血清IGF-1水平与同年龄相匹配的对照组相比明显下降(P＜0.05)。10天MMI组同10天对照组相比，差异有显著性(P＜0.05)。第二部分：C+MMI组同C组、40／15+MMI组同40／15组、40／15与C+MMI组、C组同40／15+MMI组相比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。第三部分：4天MMI组血清IGF-1水平同年龄相匹配的rhIGF-1组相比明显下降，差异有显著性(P＜0.05)。5．IGF-1 mRNA在视网膜组织中的表达PCR产物半定量分析：4天时MMI组IGF-1mRNA转录同对照组相比，未见明显下降，两者差异无统计学意义。10天时MMI组IGF-1mRNA转录同对照组相比，两者差异亦无统计学意义。6．动物生长发育情况第一部分：自第4天开始，观察到MMI组新生鼠同对照组相比明显的生长发育迟缓。第二部分：饮用普通自来水的C组和40／15组幼鼠生长发育基本正常，而饮用MMI的C+MMI组和40／15+MMI组幼鼠可见明显的生长发育迟缓。第三部分：MMI组新生鼠同rhIGF-1组相比，可见生长发育迟缓，随时间延长，两组幼鼠体重逐渐接近。结论：1．MMI可抑制正常的视网膜血管发育，引起新生血管，可能与早期血清IGF-1水平的下降有关。MMI能加重高氧诱导的新生幼鼠视网膜新生血管的发生率和严重程度。2．MMI诱导血管增生性视网膜病变幼鼠模型是研究全身因素对ROP影响的合适模型。皮下注射rhIGF-1可促进上述模型中未成熟视网膜的血管发育，一定程度地抑制视网膜新生血管的形成，提示全身应用rhIGF-1在ROP的预防及治疗中可能具有潜在的应用价值，但由于IGF-1在ROP病变Ⅰ期及Ⅱ期可产生不同的生物学效应，必须严格把握好治疗的时机。