新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)作为一种机会性致病真菌,主要感染免疫力缺陷人群,例如HIV病毒携带者,器官移植产生排异现象的患者以及接受大量类固醇药物治疗的病人,它感染患者中枢神经系统,引发脑膜炎。新型隐球酵母三个重要的致病因子为：(1)漆酶；(2)多糖荚膜；(3)宿主体温(37℃)条件下的生长能力。细胞定位研究表明,新型隐球酵母的漆酶共价结合于细胞壁多糖,是一种多酚氧化酶,可以氧化多巴胺等儿茶酚胺类底物产生一种黑色素。新型隐球酵母的基因组中存在两个漆酶基因的同源物,CNLAC1和CNLAC2。在葡萄糖去阻遏条件下,前者表达主要的漆酶活性。漆酶受到多种环境信号的调节,包括营养物的缺乏,多价阳离子的存在和温度压力等,并受信号转导途径的调节。本文首次采用RT-PCR方法从mRNA水平研究漆酶响应多种环境因子的转录调控,并研究多种基因突变对CNLAC1转录与表达的影响,得出以下重要结论： 1.葡萄糖阻遏下调CNLAC1基因的转录水平,并降低漆酶活性。 2.Cu离子强烈诱导CNLAC1基因的转录,并增加漆酶活性。 3.高温条件(37℃)使CNLAC1基因的转录水平降低。 4.Cu离子强烈的诱导作用可解除葡萄糖的阻遏,上调CNLAC1转录水平。 5.Cu离子在高温抑制条件下仍可诱导CNLAC1的转录。 6.在血清型A菌株(H99,Δlac2等)中,漆酶表达滞后于CNLAC1基因转录至少6小时；由于菌体被较厚的荚膜包裹,漆酶活性具有积累效应。 7.在血清型D菌株(JEC21)中,漆酶表达与CNLAC1转录几乎同时发生；由于血清型D菌体荚膜较薄,因而没有漆酶活性的积累效应。另外,JEC21菌株的漆酶活性也较低。 8.Cu转录应答因子(Cuf1)的缺失使菌体对Cu离子敏感,Cu离子下调Δcuf1中CNLAC1基因的转录。 9.Cu转运蛋白(Ctr4)的缺失不影响Cu离子对CNLAC1转录的诱导作用,推测细胞中有其他的Cu转运蛋白；可能由于Δctr4的荚膜变薄,菌体更容易吸收Cu离子,在Cu的诱导下,CNLAC1转录与表达均高于野生型。 10.CLC缺失(Mlac3菌株)不影响CNLAC1的转录水平,但使漆酶活性降低3倍,说明CLC可能参与漆酶基因的转录后调控或蛋白质翻译等。 11.cAMP信号途径并不影响CNLAC1的转录水平,而可能影响CNLAC1的转录后调控或蛋白质翻译与修饰等过程。 12.氮源的加入抑制CNLAC1的转录,Δcnmr突变不受该抑制,说明CNMR基因编码的氮源抑制因子抑制CNLAC1的转录。