hVps29p的结构和功能以及14-3-3θ、CH锌指、DNAJC8和GLP的克隆、表达、纯化、鉴定和结晶学研究

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  本文对hVps29p的结构和功能进行了研究。文章从人大脑文库中克隆了hVps29基因的全长序列,酶切位点为NdeI和XhoI。构建了hVps29的表达质粒hVps29p-pET22b,并在E.coli[BL21(DE3)]获得了高表达的可溶蛋白。分子筛和动态光散射实验证实hVps29p在溶液中主要以单体存在,为此推测hVps29p的单体是一种稳定且行使功能的单位。hVps29p在溶液中可以结合金属离子,特别是对Fe3+和Ni2+的结合能力较强。文章同时提出,Galectin在细胞内有多种功能,目前已经发现它们可作为调控子参与细胞间的粘附、信号传导作用并与多种肿瘤疾病相关。AF161508是一个新近发现的基因,目前还没有结构和功能的报道,其表达产物暂命名为Galectin-likeprotein(GLP)。本文克隆、表达、纯化GLP,并用气象扩散法获得了该蛋白的晶体。应用转膜及N端氨基酸序列测定表明它的23-LSSP和31-VYFE容易发生降解。
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