富磷脂紫苏毛油的提取及脱胶油脚中磷脂的制备

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紫苏,一年生草本,是中国卫生部批准的的第一批既是食品也是药品的物品。紫苏油中富含大量α-亚麻酸,可以推测,紫苏磷脂中α-亚麻酸含量也较高。目前,国内磷脂产品多以大豆磷脂为主,而大豆磷脂中亚油酸含量最高,α-亚麻酸含量很低。与大豆磷脂相比,紫苏磷脂中富含ω-3多不饱和脂肪酸,可以有效改善现有磷脂产品中ω-6多不饱和脂肪酸过量的情况。因此,为综合利用紫苏资源并获得功能性紫苏磷脂,本研究以紫苏籽为原料,对富含ω-3多不饱和脂肪酸的粉末磷脂和高含量磷脂酰乙醇胺(PE)的制备、纯化与鉴定进行了系统性研究。以紫苏籽为原料,确定富含磷脂的紫苏毛油的提取工艺。通过压榨法和浸出法提取紫苏毛油,得到两者的出油率分别是26.84%和39.60%,紫苏毛油的总磷脂含量分别是1.37mg/g和2.24mg/g,由此可知,浸出法更有利于紫苏毛油和总磷脂的提取。与此同时,测得紫苏籽的含油率为41.60%,远远高于大豆等油料。采用浸出法提取紫苏毛油,以紫苏毛油的总磷脂含量为评价指标,研究料液比、提取温度、提取时间对紫苏毛油浸出的影响,通过响应面优化得到最佳工艺条件为:料液比(M:M,g:g)1:2.35、提取温度65℃、提取时间2.5h,测得紫苏籽粉的出油率为39.80%,所得紫苏毛油呈现黄色清亮外观,有紫苏特殊香气,总磷脂含量为2.26mg/g,酸值为2.51mg/g,过氧化值为5.28mL/g(0.01mol/L Na2S2O3),皂化值为192.1mg/g,碘值为208.4g/100g。经气相色谱(GC)分析可知,紫苏毛油中的不饱和脂肪酸含量为92.15%,主要包括α-亚麻酸、亚油酸和油酸,其中α-亚麻酸的含量高达61.40%,是十分难得的α-亚麻酸来源。以紫苏毛油为原料,采用酸法脱胶制备紫苏浓缩磷脂,研究水添加量、酸添加量、脱胶温度和脱胶时间对浓缩磷脂丙酮不溶物含量的影响,通过正交实验优化得到最佳工艺条件为:水添加量4%,酸添加量0.30%,脱胶温度65℃,脱胶时间40min,制得的浓缩磷脂呈黄棕色,有特殊气味,丙酮不溶物含量为65.1%。以浓缩磷脂为原料,采用丙酮对其进行脱油,以粉末磷脂得率为评价指标,兼顾产品的丙酮不溶物含量,考察料液比、脱油温度、脱油时间和脱油次数对粉末磷脂得率的影响,通过正交实验优化得到最佳脱油工艺条件为料液比(M:V,g:mL)1:8,脱油温度20℃,脱油时间20min,脱油次数3次,制得的粉末磷脂得率为66.3%,丙酮不溶物含量为90.8%。采用气相测谱法(GC)测定粉末磷脂的脂肪酸组成,结果表明,粉末磷脂脂肪酸以多不饱和脂肪酸为主(占总脂肪酸的72.76%),其中α-亚麻酸含量最多(34.39%),亚油酸次之(17.33%)。通过高效液相色谱(HPLC)法对制得的粉末磷脂进行测定,结果表明,紫苏粉末磷脂中磷脂酰乙醇胺(PE)含量最高,占粉末磷脂的23.11%。采用硅胶柱层析法进一步纯化紫苏粉末磷脂,在兼顾PE含量的条件下,得到高收率的PE。在紫苏粉末磷脂上样量为3g时,收集所有含有PE的流出液,考察洗脱剂和洗脱流速对PE含量的影响,确定最佳工艺条件为:洗脱剂为氯仿:甲醇(V:V,mL:mL)=0:1,洗脱流速为3.0mL/min,此条件下纯化得到的PE得率为37.02%,含量为62.25%,是粉末磷脂中PE含量的2.69倍。采用液质联用(HPLC-MS)法对紫苏PE的分子种类进行鉴定,结果表明,紫苏PE分子种类有9种,分别为16:0/18:3-PE,16:0/18:2-PE,16:0/18:1-PE,18:3/18:3-PE,18:2/18:3-PE,18:2/18:2-PE,18:1/18:3-PE,18:1/18:2-PE,18:1/18:1-PE。
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