热应激条件下内毒素对肉鸡免疫功能影响的研究

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动物热应激病是一种常发疾病。国内外的研究报道表明,热应激可以对家禽的生长性能、产蛋性能造成严重影响,特别是对机体的免疫功能也会造成严重影响。急性热应激的发病机理一直是研究热点。我们参照已报道的急性热应激模型,以肉鸡为试验对象设置热应激条件。通过临床症状观察、血液常规指标和生化指标检测、鲎试剂法检测内毒素、组织病理学及分子生物学等实验方法,研究热应激对肉鸡免疫功能的影响。主要研究结果如下:1临床症状及病理学检查结果:随着热应激时间的持续,肉鸡出现精神沉郁、呼吸困难、腹泻等症状。病理学检查结果表明,热应激初期肉鸡小肠绒毛、黏膜和黏膜下层未见明显变化,后期小肠绒毛发生断裂、毛细血管淤血、黏膜上皮细胞发生脱落。热应激初期肉鸡的脾脏、胸腺和法氏囊出现毛细血管扩张,充血,到后期免疫器官的淋巴细胞减少,细胞核裂解,说明热应激对机体免疫器官损伤随时间持续逐渐加剧。2鲎试剂试验结果:热应激初期试验组肉鸡血清内毒素含量呈极显著的升高,随着热应激持续血清内毒素含量明显升高,热应期后期试验组内毒素含量几乎是对照组的7倍。在肉鸡热应激期间热应激组和VC组内毒素含量虽有差异但差异均不显著。3血常规试验结果:热应激初期肉鸡血液红细胞数目轻微升高,到后期显著降低,并且与对照组相比呈差异显著;在热应激各时间段,VC组与试验组红细胞数目相比呈差异不显著。血液白细胞在热应激初期显著降低,而后显著升高。说明红细胞和白细胞在热应激期间受到明显的影响,VC对于缓解热应激的影响效果不明显。4动物生化试验结果:试验组肉鸡肝脏功能相关指标ALT、AST持续升高,与对照组相比,呈差异极显著,说明肉鸡热应激条件下肝脏组织受到损伤,肝脏功能受到影响。肾脏功能相关指标CREA在热应激初期呈显著升高,随着热应激时间的持续升高也越明显;BUN在热应激初期升高不明显,随着热应激时间的持续BUN呈显著性升高;TP、GLOB、ALB在热应激初期,试验组与对照组相比差异显著,随着时间持续差异不显著。说明肉鸡在热应激过程中,肝肾受到损伤的同时,机体的免疫功能也受到抑制。5 RT-PCR法对脾脏内毒素受体检测结果:与对照组相比,试验组肉鸡脾脏中TLR4受体m RNA的相对表达量呈先降低后持续升高的变化趋势,并且随着肉鸡热应激时间的持续TLR4受体m RNA的相对表达量也越明显,10 h时,热应激组的相对表达量急速升高约为对照组的1.778倍;而VC组肉鸡脾脏中TLR4受体m RNA的相对表达量呈持续下降的变化趋势。这说明大量的内毒素进入血液对肉鸡免疫功能产生一定的影响。综上所诉,持续的热应激能够引起肝脏细胞的清除机能下降,肉鸡的肠道损伤,大量的肠道内毒素进入血液系统,形成内毒素血症,随着血液循环进入机体的免疫器官,并且随着热应激时间的持续对机体的红细胞、白细胞数目及免疫器官损伤程度加剧;肠源性内毒素血症的发生导致脾脏内毒素受体TLR4 m RNA的表达上调,说明热应激条件下内毒素对肉鸡免疫器官具有损伤功能。而VC在缓解热应激所致内毒素对肉鸡免疫功能损伤方面有一定的作用,但作用不是很明显。
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