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目的:1探讨孕妇HBsAg携带状态及孕晚期应用HBIG干预对其胎盘组织HBsAg、TLR3、TLR4、TLR7表达的影响;2 HBsAg携带孕妇胎盘组织TLR3、TLR4、TLR7表达与新生儿外周血HBV-Ms的关系。方法:2010年6月~2010年12月在暨南大学附属第一医院门诊正规产检的孕妇,根据知情同意原则,将符合实验要求的HBsAg携带孕妇53例作为研究组,其中HBeAg阳性占37.7%(20/53);HB-PreS1阳性占30.2%(16/53);HBV-DNA阳性(DNA≤103copies/ml为阴性组;DNA>103copies/ml)为阳性组占30.2%(16/53),孕晚期应用HBIG干预治疗的占13.2%(7/53)。将同期正规产检的夫妻双方HBsAg均为阴性的10例正常孕妇作为正常对照组。收集孕妇和新生儿的一般临床资料,经临床检测排除HIV、HPV、HCMV等主要病毒及其它微生物的感染。分娩当时取胎盘组织,固定,包埋,切片;新生儿于出生12小时内(主被动免疫前)采集股静脉血2.5 mL置肝素抗凝管,3000 rpm离心10分钟,分离血浆后-20℃保存,以备进行HBV-Ms和HBV-DNA检测。进行下述研究:①免疫组化检测胎盘组织中的HBsAg、TLR3、TLR4、TLR7的表达;②ELISA法检测新生儿血清HBsAg, HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HB-PreS1;③采用荧光定量PCR检测新生儿血清HBV-DNA。结果:1.对HBsAg携带组与HBsAg阴性组孕妇的年龄、分娩孕龄、分娩方式及两组新生儿体重、性别进行均衡性检验,组间差异无统计学意义(P>0.05)。HBsAg阳性孕妇新生儿外周血HBV-Ms中以HBsAb、HBeAb、HBcAb的形式为多,分别为52.8%(28/53);45.3%(24/53);77.4%(41/53),其中有6例新生儿HBV标志物中HBeAg阳性,占11.3%(6/53),所有新生儿HBV-DNA均<500拷贝/mL。2.免疫组化显示HBsAg携带孕妇的胎盘组织及正常对照胎盘组织中表达TLR3、TLR4、TLR7。4例HBV携带孕妇和2例正常对照孕妇的胎盘中未能检测到TLR3的表达,仅1例HBsAg携带孕妇未能检测到TLR7的表达,其余均能检测到TLR3、TLR4、TLR7的表达,阳性信号位于胎盘各层细胞上,包括蜕膜细胞(decidual cell, DC)、滋养层细胞(trophoblastic cell, TC)、胎盘绒毛间质细胞(villous meseachymal cell, VMC)、绒毛毛细血管内皮细胞(villous capillary endothelial cell, VCMC)。53例HBsAg携带孕妇的胎盘中仅3例胎盘HBsAg呈阳性表达,阳性信号局灶性分布在VMC、VCMC。胎盘HBsAg阴性TLR3、TLR7的表达较对照组高,差别有统计学意义(P<0.017),TLR4的表达差异无统计学意义(P>0.05)。3. HBsAg携带孕妇胎盘组织中TLR3、7的表达高于正常胎盘组织,差异有统计学意义(t=5.938,P=0.000;t=5.647,P=0.000),而TLR4的表达差异无统计学意义(t=0.496,P=0.522);在HBsAg携带孕妇的胎盘组织中,TLR7的表达及分布较TLR3更强和广泛(P<0.05)。4.研究孕妇HBeAg阳性或乙型肝炎前S1抗原(HB-PreS1)阳性或HBV-DNA阳性(DNA≤103copies/mL为阴性组;DNA>103copies/mL为阳性组)对胎盘组织TLR3、TLR4及TLR7表达的影响,结果发现HBeAg阳性或HB-PreS1阳性或HBV-DNA阳性组TLR3、7的表达较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);TLR4的表达差异无统计学意义(P>0.05)。5.研究孕晚期使用HBIG对胎盘组织TLR3、TLR4及TLR7表达的影响,结果发现孕晚期使用HBIG组的TLR3、7的表达较对照组高,差异有统计学意义(P<0.017);TLR4的表达差异无统计学意义(P>0.05)。6.新生儿HBsAb阳性者胎盘组织TLR3的表达显著高于阴性者,差异有统计学意义(P<0.05)。新生儿外周血乙肝表面标志物HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性组TLR3、TLR7的表达较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);TLR4的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1 HBsAg携带孕妇胎盘组织TLR3、TLR7表达显著高于正常非HBsAg携带孕妇,胎盘TLR3、TLR7可能参与HBV垂直传播的免疫调控;2、胎盘TLR4的表达在HBsAg携带孕妇与正常孕妇间无显著性差异;3、HBsAg携带孕妇胎盘TLR3的高表达与新生儿HBsAb密切相关,胎盘TLR3可能参与新生儿抗HBV的免疫调节。