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背景:原发性肝癌是一种常见的恶性肿瘤,其中肝细胞性肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)约占原发性肝癌中的75%-85%。TARBP2(Transactivation Response ElementRNA-bindingProtein,TARBP2)是microRNA(miRNA)在生成和成熟过程中的一种关键蛋白,现有研究表明TARBP2同时也对多种恶性肿瘤的发生和发展具有一定调控作用,但TARBP2在HCC中的作用和分子机制尚未阐明。
方法:本研究采用qRT-PCR检测肝癌细胞系、HCC患者组织和血液标本中TARBP2mRNA的表达水平,免疫组化检测TARBP2蛋白在HCC患者癌组织和对应癌旁组织中的表达水平;利用慢病毒载体构建TARBP2稳定过表达和敲除肝癌细胞系模型,通过CCK-8、克隆形成、划痕、Transwell和细胞周期等实验,检测TARBP2对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和细胞周期功能的影响。
结果:基因水平:TARBP2mRNA在各肝癌细胞系中的表达均低于正常肝细胞系,HCC患者肝癌组织中TARBP2mRNA水平低于对应癌旁组织(pairedt-testp-value=0.0045),HCC患者外周血液白细胞中TARBP2mRNA水平显著低于健康对照组(Mann-Whitneytestp-value=1.46×10-11)。蛋白表达水平:免疫组化结果显示,TARBP2蛋白在肝癌组织中的表达低于其在对应癌旁组织中的表达(pairedt-testp-value=0.0037)。细胞学功能学实验:在HepG2细胞系中稳定过表达TARBP2后,HepG2细胞系增殖、迁移和侵袭能力均减弱,细胞周期G1期的比例增加;而在HepG2细胞中稳定敲除TARBP2后,HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强,细胞周期G1期的比例减少。
结论:TARBP2在HCC患者中呈现异常低表达,TARBP2的表达降低可促进HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭,并且影响细胞周期,从而参与调控HCC的发生发展。本课题研究结果为HCC的诊断和治疗提供新的分子靶标。
方法:本研究采用qRT-PCR检测肝癌细胞系、HCC患者组织和血液标本中TARBP2mRNA的表达水平,免疫组化检测TARBP2蛋白在HCC患者癌组织和对应癌旁组织中的表达水平;利用慢病毒载体构建TARBP2稳定过表达和敲除肝癌细胞系模型,通过CCK-8、克隆形成、划痕、Transwell和细胞周期等实验,检测TARBP2对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和细胞周期功能的影响。
结果:基因水平:TARBP2mRNA在各肝癌细胞系中的表达均低于正常肝细胞系,HCC患者肝癌组织中TARBP2mRNA水平低于对应癌旁组织(pairedt-testp-value=0.0045),HCC患者外周血液白细胞中TARBP2mRNA水平显著低于健康对照组(Mann-Whitneytestp-value=1.46×10-11)。蛋白表达水平:免疫组化结果显示,TARBP2蛋白在肝癌组织中的表达低于其在对应癌旁组织中的表达(pairedt-testp-value=0.0037)。细胞学功能学实验:在HepG2细胞系中稳定过表达TARBP2后,HepG2细胞系增殖、迁移和侵袭能力均减弱,细胞周期G1期的比例增加;而在HepG2细胞中稳定敲除TARBP2后,HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强,细胞周期G1期的比例减少。
结论:TARBP2在HCC患者中呈现异常低表达,TARBP2的表达降低可促进HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭,并且影响细胞周期,从而参与调控HCC的发生发展。本课题研究结果为HCC的诊断和治疗提供新的分子靶标。