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目的:ghrelin是Kojima于1999年发现的一种多肽,由28个氨基酸组成,分子量为3314D,为生长激素促分泌素受体的内源性配体,能够促进生长激素的释放,为继生长激素释放激素和生长抑素之后调节生长激素分泌的第三个主要激素。既往研究已证明ghrelin减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,减轻脑水肿和血脑屏障的破坏,抑制脑组织中水通道蛋白4的表达。脓毒症脑病(sepsis associated encephalopathy,SAE)目前是脓毒症比较常见的并发症,是严重的中枢神经系统功能障碍,并且缺乏中枢神经系统感染的临床或实验室证据。本研究通过观察生长素释放肽(ghrelin)对脓毒症脑损伤小鼠血脑屏障完整性、脑含水量、炎症因子如肿瘤坏死因子a(TNF-a)、白介素IL-1β(IL-1β)、氧化应激反应、神经元细胞的凋亡及PI3K/Akt信号通路中p-Akt和Bcl-2(抗凋亡蛋白)影响,进而探讨ghrelin能否抗脓毒症引起的脑损伤,及其可能机制。 方法:由天津医科大学动物中心提供健康雄性成年C57BL/6J小鼠240只,随机分为4组,对照组(n=60)、手术组(n=60)、手术+ghrelin组(n=60)、手术+ghrelin+LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂)组(n=60),除对照组外,将其余各组小鼠结扎盲肠,建立脓毒症模型。每组小鼠均自由摄食饮水,生存环境无菌,计算术后7天小鼠存活率。使用EB(伊文思蓝)试剂检测血脑屏障完整性,术后48h用ELISA试剂盒测定血清和大脑皮质中的炎症因子(TNF-a、IL-1β)水平、术后48h用试剂盒测定血清和大脑皮质中SOD和MDA含量、TUNEL法检测神经元细胞的凋亡。Western blot检测蛋白表达水平。应用SPSS17.0统计软件处理实验数据,结果以-x±s表示,费尔舍精确检验分析小鼠生存率,使用单因素变量分析比较组间差异,P<0.05认为有统计学意义。 结果:对照组7d存活率为100%,手术组7d存活率28%,和对照组相比显著降低(p<0.05),ghrelin处理组,7d生存率和手术组相比增加到50%(p<0.05)。然而手术+ghrelin+LY组生存率24%,(和手术+ghrelin组相比,P<0.05)。ghrelin能够增强血脑屏障的完整性,减轻脑水肿和神经元细胞的凋亡,增强超氧化物歧化酶(SOD)活性,增加p-Akt和Bcl-2的表达,降低TNF-a、IL-1β、Bax的表达,降低丙二醛(MDA)含量。(均P<0.05),Ghrelin的以上作用可被PI3K通路抑制剂LY294002阻断。 结论:Ghrelin能显著提高脓毒症小鼠7天存活率,减轻脓毒症小鼠脑损伤,可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。