论文部分内容阅读
茶多酚是植物细胞中的一种具有多羟基结构的物质,具有抗氧化、抗衰老等多种功效,它是日照绿茶中的主要活性成分。本研究通过提取日照绿茶中的茶多酚,采用体外抗氧化法研究了茶多酚提取物的体外抗氧化活性,并通过建立由脂多糖诱导的Wistar大鼠肝损伤模型进行体内效果评价及机制研究。试验主要研究包括以下五个方面:（1）采用乙醇提取法制备茶多酚提取物,研究了提取条件对茶多酚提取率的影响,并得出最适提取条件。采用单因素试验法研究了乙醇浓度、提取时间、提取温度、液固比对茶多酚提取率的影响,然后利用正交试验优化提取条件为:乙醇浓度为50%,提取时间为40 min,提取温度为65℃,液固比为20:1,经过验证此时的提取率为13.54%。（2）研究了酶法提取茶多酚的提取条件对茶多酚提取率的影响,并得出最适提取条件。采用单因素试验法研究了复合酶配比、液固比、pH值、酶解温度、酶解时间对多酚提取率的影响,然后用响应面模型,以茶多酚提取率为响应值,以酶解时间、酶解pH、酶解温度为变量进行试验。并确定了最佳提取组合为:酶解时间79 min,酶解pH为5.3,酶解温度为58℃,此时的提取率可达到最大值24.03%。（3）研究了超声波乙醇辅助提取法提取茶多酚的提取条件对茶多酚提取率的影响,并得出最适提取条件。采用单因素试验法研究了超声时间、超声功率、超声温度、液固比、乙醇浓度对多酚提取率的影响,然后采用响应面模型,以茶多酚提取率为响应值,超声时间、超声功率、液固比为变量进行试验,确定了最佳提取组合为:提取时间23 min,超声功率505 W,液固比为26:1,此时的提取率可达到最大值33.79%。（4）采用体外抗氧化测定法对茶多酚提取物的抗氧化能力进行探究。通过测定茶多酚提取物的DPPH·、OH·、ABTS·、O2-·清除率,评价茶多酚提取物抗氧化能力。结果显示,日照绿茶茶多酚提取物清除DPPH·、OH·、ABTS·能力较强,有一定的O2-·清除能力。（5）研究茶多酚提取物在大鼠体内的抗氧化效果。为了研究茶多酚提取物对脂多糖（LPS）诱导的Wistar大鼠氧化损伤的保护作用,利用脂多糖氧化诱导大鼠发生氧化应激,建立大鼠肝损伤动物模型。将大鼠分为正常组,模型组,药物组,低中高剂量组。在大鼠被饲养8周后测定肝脏组织匀浆中SOD、GSH-Px、CAT的活力,MDA的含量;血清中IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12及TNF-α的含量,测定大鼠血清DPPH自由基、羟自由基、超氧自由基清除能力。结果表明,与模型组相比,低、中、高剂量组茶多酚提取物的SOD,GSH-Px和CAT活性明显增加（P<0.05）。高剂量组的效果尤为明显;而低,中,高剂量组的MDA明显降低（P<0.05）,高剂量组的效果较好。中高剂量组中TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-12的含量显著低于模型组（P<0.05）;高剂量组的效果更好。中、高剂量组IL-10显著高于模型组,两组之间无显著差异（P>0.05）。因而茶多酚提取物在抑制大鼠肝脏的氧化损伤中起重要作用。