【摘 要】
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红曲广泛应用于食品和医药行业。红曲中含有多种次级代谢产物,如红曲色素,莫纳可林系列等等。其中红曲色素主要作为着色剂使用,莫纳可林系列作为降血脂的活性成分,一直以来备
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红曲广泛应用于食品和医药行业。红曲中含有多种次级代谢产物,如红曲色素,莫纳可林系列等等。其中红曲色素主要作为着色剂使用,莫纳可林系列作为降血脂的活性成分,一直以来备受大家的关注。本文主要研究以TUST001为发酵菌种,在去除发酵产物中的MonacolinK以后对HepG2细胞胆固醇代谢的影响。将发酵产物提取后进行细胞实验发现,不同品种的大米作为发酵底物产生的红曲米对HepG2的抑制作用有所区别,但抑制效果都高于同浓度的Monacolin K标准品。采用高温灭菌和未灭菌组比较发酵产品对HepG2细胞增殖的抑制作用发现:高温灭菌略微降低红曲抑制HepG2细胞增殖的活性。TUST001发酵产物的醇提物配成不同浓度作用于HepG2细胞,48小时后测定与胆固醇代谢相关基因表达发现:HMGCR,SREBP-2,LDLR,CYP7A1,LXR-α的转录表达都有一定的提高。分别采用高速逆流色谱和制备型高效液相色谱技术去除红曲霉TUST001发酵产物粗提物中的Monacolin K。经高速逆流色谱法分离获得到三个组分:MKA,MKL以及MKF,制备型液相色谱分离获得六个组分。将分离获得各组分分别作用于HepG2细胞,发现他们均能对HepG2细胞的增殖产生抑制作用,其中效果比较好的是MKA,MKL,MKF,组分3及组分5。用试剂盒测定细胞的胆固醇含量后发现,MKF组HepG2细胞的胆固醇降低了 19.7%。红曲中MKF组分降低胆固醇的现象说明,除了 Monacolin K外,红曲中还有其他降胆固醇的物质。最后,测定经MKF培养的HepG2细胞基因的转录表达,其中HMGCR,LXR-α基因的表达量与空白组相同,SREBP-2,CYP7A1的表达量有所增高,而LDLR基因的表达量有所降低。
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