甘蓝子叶型胚状体诱导及其成苗因素的研究

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游离小孢子培养以其能够大大缩短育种年限,培养效率高等优势被广泛应用到作物育种中,甘蓝游离小孢子培养已基本获得成功,但还存在子叶型胚率低和胚状体成苗困难等问题。试验以23份优良甘蓝品种为试材,进行了游离小孢子培养和胚状体植株再生技术研究,主要探讨了不同基因型、花蕾供体植株株龄、添加不同浓度秋碱和TDZ对小孢子诱导出胚和子叶型胚率的影响;同时研究了甘蓝材料、胚状体类型、不定芽大小、烯效唑等对不定芽诱导和生根的影响,获得研究结果如下:1.甘蓝基因型是影响小孢子出胚和子叶型胚率的主要因素。试验诱导培养的15份国外引进材料中有13份获得了胚状体,其中最高胚产率为14.0胚/蕾,最少的仅为0.2胚/蕾;出胚材料中子叶型胚率变化范围为0.03胚/蕾到2.92胚/蕾。2.3个甘蓝供试品种半成株材料均比成株更有利于小孢子出胚,表明甘蓝半成株比成株更适合作为小孢子培养的供体植株。3.在甘蓝小孢子培养过程中添加0.02mg/L TDZ处理能够明显提高出胚率和子叶型胚率。出胚率和子叶型胚率比对照分别提高Q10-4为12.7胚/蕾和18.8胚/蕾,Q10-5为13.6胚/蕾和18.6胚/蕾。4.在甘蓝小孢子热激培养过程中添加30mg/L秋水仙碱之后能够显著提高甘蓝小孢子子叶型胚率和双单倍体率。其中10-23子叶型胚率比对照提高3.3胚/蕾,植株加倍率达85.9%。5.甘蓝不同基因型材料均表现为子叶型胚容易发育单芽,而鱼雷型胚和球型胚容易形成丛生芽。且单芽率和丛生芽率在不同基因型之间存在差异。6.高度大于2cm的不定芽转接到生根培养基上后生长速度先快后慢,生根数少且细长。小于2cm的不定芽生长速度先慢后快,生根数多且粗壮。7.添加0.5mg/L烯效唑的MS+0.3mg/LNAA生根培养基中生根率最高且根系生长健壮,成活率达到95.6%。
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