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三角梅(Bongainvillea Brasiliensis Raeusch.)是紫茉莉科(Nyctaginaceae)南美紫茉莉属(或叶子花属)(Bougainvillea)的常绿攀援状灌木,目前在亚热带和热带地区广泛栽培,品种多达一百种以上。三角梅众多品种的遗传背景复杂,国内外迄今有关三角梅品种间亲缘关系的研究资料甚少。为三角梅品种选育、分类和进一步的生物学研究提供理论基础,本研究运用ISSR分子标记对68份三角梅种质进行研究,分析了其遗传多样性和亲缘关系。主要研究结果如下:1.针对三角梅叶片中富含色素、酚类化合物和多糖等物质的情况,研究对比了4种DNA提取方法对三角梅总DNA提取的效果。研究表明改良的CTAB mini法提取的三角梅DNA,无论是从浓度和纯度上都可以满足ISSR分析的要求,为下一步试验提供了材料。2.对三角梅ISSR反应体系进行了优化,建立了适合三角梅ISSR扩增的体系和程序。该反应体系为:每20μL体系中含1.0 UTaq酶、0.3μmol/L引物、250μmol/LdNTPs、20 ng模板DNA、2μL10×Buffer。扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性60s,在最适退火温度下退火60s,72℃延伸120s,34个循环;72℃延伸7min后4℃保存。同时,通过温度梯度PCR确定了各引物的最适退火温度。该优化体系条带清晰效果良好,能够满足ISSR分析,为下一步对三角梅进行ISSR分子标记奠定了基础。3.应用14个ISSR引物,对68份三角梅材料进行了ISSR扩增,获得了195条谱带,其中多态性条带182条,多态性比率为93.3%。数据表明了ISSR扩增的带纹丰富,多态性条带检出率高。同时研究发现在14个引物中有11个为二核苷酸重复序列,表明三角梅基因组中以二核苷酸重复序列居多。依据ISSR分析结果,对供试的68个品种进行聚类分析,结果表明:三角梅材料间的遗传相似系数在0.50-0.97之间,平均相似系数为0.67,这说明供试的68份三角梅分析材料间的遗传多样性不是特别丰富、亲缘关系较近。通过聚类图,可在0.64水平处将材料分为A类群和B类群,A类群可分为二亚类,B类群还可分为六亚类。从分子水平上揭示了三角梅不同品种之间的亲缘关系,进一步明确了品种间的遗传距离。这为三角梅优良品质性状的选择、杂交育种亲本选配和良种繁育,提供了DNA分子水平上的科学依据。