阿维菌素产生菌Bjbm0006菌株的诱变育种及发酵条件研究

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阿维菌素产生菌(streptomyces averditilis)Bjbm0006是通过基因置换的育种方法得到的一株工程菌,其发酵产物只有B组分,没有A组分。本文通过对Bjbm0006菌株的复壮,获得了一株发酵效价较高且稳定的分离株f-218。以f-218为出发菌株,探索了红霉素,链霉素抗性选育和紫外线-氯化锂、60Co-γ射线诱变、电融合和shuffling育种。结果发现:红霉素、链霉素抗性育种不仅不能得到产素较高的菌株,反而降低了效价。紫外线-氯化锂、60Co-γ射线诱变、电击法和shuffling处理后筛选到的菌株均能不同程度地提高试验菌株的产素能力。其中通过60Co-γ射线、电击法和shuffling诱变效果较好。分离到三株高产菌株10-9,25-b-4以及z-27,其中z-27发酵效价分别比出发菌株提高了167.19%。经传代试验,z-27遗传稳定性较好而且产素效价较高。 以z-27菌株为试验菌株进行了发酵培养基的研究,探索了不同碳源,不同氮源,前体和豆油等单因子对阿维菌素生物合成的影响。在单因子试验的基础上经L25(56)正交设计的筛选试验,筛选到一个发酵培养基的最佳配方。同时,对菌株z-27的装料量、温度等也做了研究,发现150毫升三角瓶中装料20ml;温度28.5℃条件下AVMB1a发酵效价最高。
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