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树莓含有多种功能性成分,如花青素、鞣花酸、黄酮、水杨酸、维生素C等,具有较高的研究价值和食用价值。花青素是一种天然色素,为我们所熟知的是它的抗氧化和清除自由基的功能。一些研究表明,花青素对真菌、酵母菌、细菌等微生物有毒害作用,可以防止DNA突变,具有抗癌,抗炎等功能。本文利用HPLC法对树莓中的花青素含量进行了测定。HPLC体系为:流动相A:乙腈:甲醇:甲酸:水=22.5:22.5:8.5:41.5(V/V/V/V);流动相B:甲酸:水=8.5:91.5(V/V)。梯度洗脱,0 min,7%A;25 min,40%A;50 min,93%A。检测波长:535 nm;流速:1.0 mL/min;柱温30℃;每次进样量为10μL。测定结果为:幼苗期至成果期的树莓叶中均不含花青素;对于树莓果,利用单因素试验测得:当提取时间为70 min时,花青素得率最高,为119.2269μg/g,当料液比为1:10时,花青素得率最高,为133.8927μg/g,当甲醇浓度为80%时,花青素得率最高,为119.9516 μg/g。进一步做正交实验,得出提取花青素的最佳工艺:提取时间为70 min,甲醇浓度为90%,料液比是1:11。最终花青素得率为156.2897 μg/g。本课题以小鼠髓源性巨噬细胞(BMDM)为材料,研究了花青素对BMDM相关促炎与抗炎细胞因子表达和生成的影响。采用MTT法检测了不同浓度花青素对BMDM细胞活性的影响,结果表明1～30 μg/mL花青素处理BMDM细胞24 h,对BMDM体外增殖没有影响。在花青素对LPS(1.0μg/mL)刺激BMDM转化M1型巨噬细胞的效应研究中,用5 μ/mL、10 μg/mL和20 μg/mL花青素分别处理M1型巨噬细胞后,检测结果表明花青素能够下调TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1、iNOS等M1型巨噬细胞标志性分子的表达,且不同浓度的花青素对不同细胞因子有不同的作用效,mRNA和蛋白水平检测结果保持一致。在花青素对IL-4(20 ng/mL)刺激BMDM细胞转化M2巨噬细胞的效应研究中,用5 μg/mL、10μg/mL和20μg/mL花青素分别处理M2型巨噬细胞,检测结果表明花青素上调IL-10、Arg-1等M2型巨噬细胞标志性性分子的表达和生成因子分泌,且不同浓度的花青素对不同细胞因子有不同的作用效果,基本呈剂量效应,mRNA和蛋白水平检测结果保持一致。上述结果提示,花青素能够抑制M1型巨噬细胞标志性因子的分泌,促进M2型巨噬细胞标志性因子的分泌,表明花青素具有抗炎效果,对与炎症相关的代谢性疾病具有预防和缓解作用。