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硒(Se)是人体所必需的一种微量元素,具有抑菌、抗癌、抗氧化等多种生物活性。纳米硒(SeNPs)不仅具有较高的生物活性和较低的毒性,而且与抗癌药物具有较好的协同抗癌效果,因而受到广泛的关注。然而,纳米硒仍然存在着一些缺点,例如稳定性较差、缺乏对癌细胞的选择性等,这些缺点限制了它在抗癌方面的应用。围绕以上问题,本研究主要做了以下工作:(1)使用具有癌细胞靶向作用的叶酸(FA)作为配体,对壳聚糖(CS)进行修饰,并对反应条件进行优化以提高叶酸与壳聚糖的结合率。叶酸-壳聚糖结合物(FA-CS)通过薄层色谱(TLC),红外光谱(FT-IR)及核磁共振氢谱(~1H-NMR)进行表征。并通过单因素考察和正交试验,对反应条件进行优化,以提高叶酸与壳聚糖的结合率。实验结果显示,叶酸成功地对壳聚糖进行了修饰,且最优的反应条件为:反应温度50℃,反应时间24h,叶酸与壳聚糖投料比2:1(w/w),通过最优反应条件所得产物的平均结合率为17.58%。(2)制备叶酸-壳聚糖修饰的纳米硒(FA-CS-SeNPs),并对其平均粒径、粒径分布、Zeta电位、形态特征及物理稳定性进行评价。使用动态激光散射法(DLS)对SeNPs及FA-CS-SeNPs的平均粒径,粒径分布,Zeta电位进行表征。使用透射电子显微镜(TEM)对FA-CS-SeNPs的形态特征进行观察。通过瑞利共振散射法(RRS)和DLS对FA-CS-SeNPs的物理稳定性进行评价。DLS结果显示,FA-CS-SeNPs的Zeta电位为+52.70mV,平均粒径69.48±1.63nm,PDI为0.16。TEM结果显示,FA-CS成功地对SeNPs进行了包覆,且FA-CS-SeNPs呈单分散的类球形,直径在50nm左右。此外,FA-CS可以显著地延缓SeNPs的聚集沉降速度,使其具有较高的物理稳定性。(3)对FA-CS-SeNPs的体外癌细胞靶向能力、抗癌效果及FA-CS的生物相容性进行评价。选取细胞表面过度表达叶酸受体的宫颈癌细胞(HeLa)和细胞表面不表达叶酸受体的人肺腺癌细胞(A549)作为供试细胞,使用MTT法测定不同浓度的FA-CS-SeNPs、壳聚糖修饰纳米硒(CS-SeNPs)、SeNPs以及FA-CS对两类细胞的毒性,从而对FA-CS-SeNPs的癌细胞靶向能力、抗癌效果及FA-CS的生物相容性进行评价。实验结果显示,FA-CS的生物相容性良好,且经FA-CS修饰的SeNPs可显著提高对HeLa细胞的毒性。(4)构建叶酸-壳聚糖修饰纳米硒与脂质体(FA-CS-Se NPs-Lips)复合体系,并对其进行表征与评价。以荧光素作为模型药物制备脂质体(Lips),脂质体与FA-CS-SeNPs共同构建FA-CS-SeNPs-Lips复合体系。脂质体和FA-CS-SeNPs-Lips复合体系的Zeta电位以及脂质体的粒径分布均使用DLS进行表征。脂质体及FA-CS-SeNPs-Lips复合体系的形态特征使用TEM进行观察。使用透析法对FA-CS-SeNPs-Lips复合体系及脂质体中荧光素的体外释放特性进行研究。选取A549细胞和HeLa细胞作为供试细胞,通过荧光显微镜和荧光分光光度计对细胞摄取荧光素的能力进行分析。实验结果显示,FA-CS-SeNPs-Lips复合体系的Zeta电位为+42.63mV,表明其具有较高的物理稳定性。FA-CS-SeNPs-Lips复合体系与脂质体相比,可显著延缓荧光素的体外释放。此外,FA-CS-SeNPs-Lips复合体系可以通过与HeLa细胞表面过度表达的叶酸受体特异性结合,显著提高细胞摄取脂质体中荧光素的能力。