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目的：非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin’s lymphoma, NHL)是一种严重危害人类健康的淋巴系统恶性肿瘤,占全部癌症病例的5.1%,且近年来发病率呈上升趋势。靶向疗法是治疗NHL的重要手段,在发挥疗效的同时还可减轻药物对正常细胞的杀伤。CD20是治疗NHL的理想靶点,因其在大多数NHL有较高表达。目前,CD20疗法主要是由单克隆抗体美罗华实现的。然而,部份患者对美罗华治疗不敏感,且很多患者会产生耐药性,因而有必要研发针对CD20的新型靶向治疗策略。靶向治疗需要能与肿瘤细胞特异性结合的靶向分子。核酸适配体(aptamer)是一类具有重要应用前景的靶向分子,由短链核酸分子构成,可形成复杂的三维结构,以高特异性和高亲和力与靶标分子结合。此外,核酸适配体还具备多种优势,如易于合成,易于修饰,易于穿透肿瘤组织,免疫原性较低等等,因而可充当性能优良的肿瘤靶向分子。迄今为止,CD20核酸适配体的研发尚未见文献报道。在本研究中,我们以CD20胞外结构域的一段多肽作为靶标,筛选了第一个针对CD20结构的核酸适配体,并在体外评估了该适配体与CD20阳性淋巴瘤细胞结合特性。方法：我们选取CD20蛋白一段胞外多肽作为靶标,用指数级富集的配体进化技术(SELEX)筛选到一个与该多肽具有较强结合力的aptamer (Z17);以流式细胞仪检测了Z17与白蛋白、IgG、胰蛋白酶、CD20阳性淋巴瘤细胞(Raji和Ramos)以及CD20阴性淋巴瘤细胞(Jurkat)的结合情况。我们还将阿霉素嵌入Z17,构建出适配体与阿霉素(Apt-Dox)的复合物,并通过阿霉素的荧光光谱分析了Apt-Dox复合物的构建情况；以共聚焦显微镜和流式细胞仪评估了CD20阳性淋巴瘤细胞Raji和CD20阴性淋巴瘤细胞Jurkat对Apt-Dox复合物的摄取；以MTS法检测了Apt-Dox复合物对CD20阳性淋巴瘤细胞Raji和CD20阴性淋巴瘤细胞Jurkat的杀伤作用。结果：(1)我们筛选的CD20适配体Z17,长度为57个碱基,经测序分析,其一级序列为5’-TGCGTGTGTAGTGTGTCTGTGTGTGTGTAGCGTGTCTGCTCTTA GGGATTTGGGCGG-3’。(2)该适配体可与CD20多肽以较高的特异性相结合,其亲和系数为100.7nM,而与白蛋白,IgG,胰蛋白酶的交叉结合较弱。(3)该适配体能够识别CD20阳性淋巴瘤细胞Raji和Ramos,但基本不结合CD20阴性淋巴瘤细胞Jurkat。(4)通过将阿霉素嵌入Z17结构,我们构建了适配体与阿霉素(Apt-Dox)的复合物。(5)体外实验中,Apt-Dox可将阿霉素带入CD20阳性的淋巴瘤细胞,并大幅度降低CD20阴性对照细胞对阿霉素的摄取。(6) Apt-Dox可导致对CD20阳性淋巴瘤细胞的靶向性杀伤,并显著降低对CD20阴性细胞的杀伤作用(P<0.01)。结论：本研究筛选出了第一个针对CD20的DNA核酸适配体,可结合淋巴瘤细胞表面的CD20结构。在体外实验中,该适配体与阿霉素的复合物(Apt-Dox)能选择性地将阿霉素带入CD20阳性的淋巴瘤细胞,并降低CD20阴性细胞对药物的摄取。上述结果提示,该适配体在研发针对CD20的新型靶向治疗方面具有潜在应用价值。