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目的1.本文通过复制大鼠心肌缺血再灌注模型,观察鞘胺醇1-磷酸2/3受体(S1PR2/3)对心脏和大鼠死亡率的影响,并探索其机制。2.观察给予Cx43机械解偶联剂(庚醇)后S1P2/3受体对缺血再灌注后大鼠心脏和死亡率的影响。方法1.健康SD雄性大鼠,随机分组如下:正常对照组、假手术组、缺血再灌注(IR)组和IR实验组。其中,IR实验组在缺血再灌注手术(缺血2h再灌注40min)前,分别给予DMSO、S1PR3激动剂、S1PR3阻断剂和S1PR2/3阻断剂处理,同步记录大鼠的心功能、心电图、心律失常发生次数及持续时间,计算心肌梗死面积,死亡率,检测心肌中ANP、BNP、Caspase-3、IL-6、Cx43等分子的m RNA表达量。2.健康SD雄性大鼠,随机分为2组,庚醇组,和给予S1PR2/3阻断剂后同时给予庚醇处理组行缺血再灌注手术,记录同上指标。用免疫组织化学染色检测心肌组织中Cx43的表达量及分布情况。结果1.在心肌缺血再灌注过程中,相较于IR对照组,给予S1PR3阻断剂组和S1PR2/3阻断剂组,大鼠心率(HR)和左心室内压最大上升与下降速率(+dp/dtmax)明显下降(P<0.05),左室舒张末期压力(LVEDP)升高(P<0.05),心肌梗死面积增大(55.68%vs 28.75%,51.59%vs 28.75%)。对比各组大鼠心律失常发生次数及持续时间,对照组和假手术组未观察到室颤,而给予S1P2/3受体阻断剂组室颤发生率和持续时间高于IR组(11%,28s vs 25%,494s;P>0.05),其它各处理组与IR组相比未见明显差异。比较不同处理组大鼠的心肌梗死面积及死亡率,发现给予S1PR3激动剂组可明显减小心肌梗死面积(18.62%vs 28.75%,P<0.05),给予S1P2/3阻断剂组后大鼠的死亡率明显高于IR组(53%vs 22%,P<0.05)。此外,各处理组大鼠心肌中ANP、BNP、Caspase-3、IL-6、Cx43的m RNA表达量与IR组及正常对照组间未见明显统计学差异。2.相较于IR组,庚醇处理组大鼠在造模过程中未出现室颤,心律失常评分降低,且大鼠心肌梗死面积(18.78%vs 28.75%,P<0.05)明显减少,大鼠死亡率(17%,P>0.05)降低,提示庚醇对心肌缺血有保护作用。给予庚醇后可以减少S1P2/3受体阻断剂造成的心肌梗死面积增大(39.27%vs 51.59%,P<0.05),减小心律失常评分,减小死亡率(P>0.05)。Cx43免疫组化染色显示,正常对照组的Cx43分布规则位于闰盘处,IR后表达量均下降,并且少量侧向化分布。而给予S1PR2/3阻断剂处理IR后,不仅Cx43表达下降而且侧向化分布显著,给予庚醇处理后可以减少这种侧向化分布。结论1.S1PR2和S1PR3对缺血再灌注心肌起保护作用,而S1PR2/3功能阻断后增加了心源性猝死(SCD)的风险。2.在心肌缺血再灌注过程中,S1P3受体激动后可以减少Cx43的侧向化分布,减少心律失常,从而减少SCD风险;S1P2/3受体阻断后通过改变Cx43分布(侧向化)增加心律失常,尤其是传导阻滞,是导致心源性猝死的原因之一,给予庚醇后可以减少由于S1P2/3受体阻断后导致的死亡率升高。