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目的:
探索心脏传导系统的解剖方法并研究电击死心脏窦房结组织中纤维连接蛋白(Fibronectin,Fn)的蛋白水平及mRNA水平的表达变化,为电击死的诊断及死亡时间的鉴定提供新的理论依据。
方法:
(1)采用改良的心脏传导系统解剖法,获取电击死及颅脑损伤死心脏窦房结样本;
(2)采用免疫组化技术(S-P法)检测电击死亡人窦房结15例(实验组)、重度颅脑损伤人窦房结15例(对照组)、电击死亡兔窦房结35例(实验分7组:0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h)和断颈处死兔窦房结35例(对照分7组:0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h)的Fn蛋白表达水平。
(3)采用荧光定量PCR技术检测电击死亡和断颈处死兔窦房结组织中Fn的mRNA水平表达变化。
结果:
(1)人电击组Fn阳性表达率为100%,有强弱之分;对照组Fn阳性表达率为6.67%,二者间有极显著性差异(P<0.01)。兔电击组电击后即刻(0h)就有Fn表达,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05);电击后3h、6h至12hFn表达分布越来越广泛,与对照组比较差异极有显著性(P<0.01),电击死后24h表达逐渐下降,至48h Fn表达仍与对照组相比有显著性差异(P<0.05),而阴性对照组则未见类似改变。
(2)兔电击死组0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h FnmRNA值分别是0.0045、0.0037、0.0032、0.0021、0.0016、0.0002、0.0001;非电击死组FnmRNA值分别是0.00037、0.00023、0.0002、0.00015、0.00016、0.00012、0.0001,二者在0h、1h、3h、6h、12h Fn mRNA表达水平有显著性差异(P<0.05),在24h、48h Fn mRNA表达水平无差异。
结论:
(1)人电击组与非电击组Fn阳性表达率有极显著性差异;
(2)兔电击组与非电击组Fn蛋白阳性表达的光密度值随死亡时间延长呈现规律性变化;
(3)兔电击组与非电击组Fn的mRNA水平随着死亡时间的延长逐渐下降。上述结果可为法医学电击死诊断和死亡时间的鉴定提供新的理论参考依据。