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【目的】克隆淡色库蚊EU073017基因,研究其与蚊抗药性关系。【方法】根据本试验室抑制性差减杂交(suppression subtractivehybridization,SSH)结合cDNA芯片筛选获得的EST片段(GenBankno.BE 247823),设计引物,从淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系cDNA文库中分别扩增出目的基因的5’和3’末端,T/A克隆于pGT载体,转化、测序、对位拼接获取基因序列。生物信息学软件分析EU073017基因编码的氨基酸序列。实时荧光定量PCR验证EU073017基因在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系和敏感品系(4龄幼虫期)的表达差异。应用基因重组方法构建EU073017基因的昆虫表达载体,并转染入白纹伊蚊C6/36细胞,经药物筛选获得稳定转染单克隆细胞系;RT-PCR鉴定目的基因在转染细胞的转录水平。Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测转染细胞系对溴氰菊酯的敏感性变化。【结果】获得淡色库蚊EU073017基因,长度为398bP,编码序列(coading sequence,CDS)长度为270 bp,推导编码89个氨基酸(GenBank no.ABU49655,2007)。该推导氨基酸序列与致死按蚊(Anopheles funestus)、冈比亚按蚊(An.gambiae)和埃及伊蚊(Aedesaegypti)同源基因推导氨基酸序列同源性分别为86%、84%和80%。实时荧光定量PCR结果显示,EU073017基因在溴氰菊酯抗性品系(4龄幼虫期)中的表达是敏感品系(4龄幼虫期)中表达的1.65倍。成功构建了EU07301基因的昆虫表达载体,并构建了稳定转染EU073017基因的单克隆细胞系。稳定转染细胞对溴氰菊酯敏感性测定结果显示:在40、60、80、100和120μM浓度的溴氰菊酯处理下,转染EU073017基因的蚊细胞存活率要高于对照组细胞系的存活率(p＜0.05)。【结论】本研究克隆了淡色库蚊EU073017基因。该基因在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中高表达。转染EU073017基因可提高蚊细胞对溴氰菊酯的抵抗性。